La differenza chiave tra RIA ed ELISA è che il test radioimmunologico (RIA) è una tecnica di test immunologico che utilizza radioisotopi per rilevare i complessi antigene-anticorpo mentre il test immunoenzimatico (ELISA) è una tecnica di test immunologico che utilizza enzimi per rilevare l'antigene -complessi anticorpali.
Il rilevamento di proteine specifiche come gli antigeni è estremamente importante nella diagnosi delle malattie. Pertanto, RIA ed ELISA sono due tecniche di test immunologico utilizzate nei laboratori per rilevare rapidamente proteine specifiche, in particolare antigeni. Generalmente, un anticorpo specifico si lega all'antigene bersaglio e forma un complesso visibile noto come precipitina. Questi complessi di anticorpi e antigeni possono essere identificati attraverso diverse tecniche. La tecnica per rilevare il complesso antigene-anticorpo utilizzando radioisotopi è nota come RIA e la tecnica per rilevare il complesso antigene-anticorpo utilizzando enzimi è nota come ELISA.
Cos'è la RIA?
Il dosaggio radioimmunologico (RIA) è una tecnica di dosaggio immunologico che rileva i complessi antigene e anticorpo utilizzando radioisotopi. Rosalyn Sussman Yalow ha sviluppato questa tecnica nel 1960 con l'aiuto di Solomon Berson. Per questa straordinaria scoperta, Rosalyn Sussman Yalow vinse il Premio Nobel per la medicina nel 1977. Tipicamente, nel test radioimmunologico, una quantità nota di un antigene viene resa radioattiva per la prima volta Questa tecnica utilizza frequentemente isotopi radioattivi gamma di iodio, chiamati 125-I, per etichettare antigeni. Questi radioisotopi normalmente si attaccano all'amminoacido tirosina dell'antigene. Quindi l'antigene radiomarcato viene miscelato con l'anticorpo. Di conseguenza, l'antigene e l'anticorpo radiomarcati si legano in modo specifico l'uno all' altro.
Successivamente, viene aggiunto un campione di siero che contiene una quantità sconosciuta dello stesso antigene. Ciò fa sì che l'antigene non marcato del siero competa con l'antigene radiomarcato per i siti di legame dell'anticorpo. All'aumentare della concentrazione dell'antigene non marcato, una maggiore quantità si lega all'anticorpo, spostando la variante radiomarcata. Pertanto, riduce il rapporto tra l'antigene radiomarcato legato all'anticorpo e l'antigene radiomarcato libero. Al termine della procedura, gli antigeni legati vengono separati. Infine, la radioattività degli antigeni liberi nel supernatante rimanente viene misurata utilizzando un contatore gamma.
Cos'è ELISA?
ELISA è una tecnica di dosaggio immunologico che rileva i complessi antigene e anticorpo utilizzando enzimi. È un test analitico biochimico descritto per la prima volta da Engvall e Perlmann nel 1971. Nella maggior parte delle forme semplici di tecniche ELISA, gli antigeni del campione del paziente sono attaccati a una superficie solida. Quindi un anticorpo corrispondente viene applicato sulla superficie, in modo che possa legarsi all'antigene.
Figura 01: ELISA
Questo particolare anticorpo è legato a un enzima. Successivamente, gli anticorpi non legati vengono rimossi mediante lavaggio con detersivo. Nella fase finale di questa tecnica, viene aggiunto il substrato dell'enzima. Se c'è un corretto legame tra antigene e anticorpo, la reazione successiva produce un segnale di colore rilevabile, più comunemente un cambiamento di colore.
Quali sono le somiglianze tra RIA ed ELISA?
- RIA ed ELISA sono tecniche di dosaggio immunologico.
- Entrambe le tecniche possiedono la formazione di antigeni e complessi anticorpali.
- Queste tecniche possono essere utilizzate per rilevare proteine sconosciute nei campioni.
- Sono entrambi usati nella diagnosi delle malattie nei laboratori.
- Entrambe sono tecniche altamente specifiche e sensibili.
Qual è la differenza tra RIA ed ELISA?
RIA è una tecnica di dosaggio immunologico per la rilevazione del complesso antigene-anticorpo mediante radioisotopi. L'ELISA è una tecnica di dosaggio immunologico per la rilevazione del complesso antigene-anticorpo mediante l'uso di enzimi. Quindi, questa è la differenza chiave tra RIA ed ELISA. Inoltre, nella tecnica RIA, l'antigene è marcato, ma in ELISA l'anticorpo è marcato. Inoltre, nella tecnica RIA, le molecole di etichettatura sono radioisotopi, mentre, in ELISA, le molecole di etichettatura sono enzimi. Quindi, questa è un' altra differenza tra RIA ed ELISA.
L'infografica qui sotto mostra più differenze tra RIA ed ELISA in forma tabellare.
Riepilogo – RIA vs ELISA
I test immunologici svolgono un ruolo molto importante in vari contesti bioanalitici, come la diagnostica clinica, l'analisi biofarmaceutica, il monitoraggio ambientale, la biosicurezza e i test sugli alimenti. Dagli anni '60 è stata sviluppata un'ampia gamma di test immunologici. RIA ed ELISA sono entrambe tecniche di dosaggio immunologico. RIA è una tecnica di dosaggio immunologico per la rilevazione del complesso antigene-anticorpo utilizzando radioisotopi. L'ELISA è una tecnica di dosaggio immunologico per la rilevazione del complesso antigene-anticorpo mediante l'uso di enzimi. Quindi, questo è il riassunto della differenza tra RIA ed ELISA.
