Differenza chiave – HPLC vs LCMS
Esaminiamo innanzitutto il significato di HPLC e LCMS prima di analizzare la differenza tra HPLC e LCMS. La cromatografia è una tecnica di separazione nell'analisi chimica in cui i costituenti del campione vengono separati durante il passaggio attraverso un mezzo cromatografico. Implica anche l'interazione con il campione, la fase stazionaria e la fase mobile. HPLC è l'acronimo di High Performance Liquid Chromatography e viene utilizzato come metodo di cromatografia liquida in chimica analitica. La combinazione di cromatografia liquida e spettroscopia di massa (LCMS) è stata sviluppata per l'analisi quantitativa di biomolecole selezionate ed è una procedura di analisi altamente sensibile, accurata e specifica rispetto all'HPLC. Questa è la differenza chiave tra HPLC e LCMC. Questo articolo ti introdurrà a HPLC e LCMC che si occupano di analisi chimica e discuterà le differenze tra HPLC e LCMS.
Cos'è l'HPLC?
La cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) è una tecnica di separazione popolare nella chimica analitica. Viene utilizzato principalmente per separare i componenti, per identificare e quantificare ogni componente in una miscela. In precedenza, questo metodo era noto come cromatografia liquida ad alta pressione perché dipendeva dalle pompe per far fluire un solvente liquido pressurizzato comprendente la miscela del campione attraverso una colonna riempita con un materiale adsorbente solido. Ogni singolo costituente della miscela campione interagisce in modo diverso con il materiale adsorbente solido, il che si traduce in portate diverse per diversi costituenti. Ciò può portare alla separazione dei costituenti mentre escono dalla colonna HPLC.
HPLC è stato utilizzato per varie applicazioni come l'analisi dei livelli di vitamina D nel sangue, l'uso illegale di droghe da parte degli atleti rilevando i residui di droga nelle loro urine, selezionando i componenti di un campione biologico complesso per scopi di ricerca e analisi e produzione di prodotti farmaceutici.
Cos'è LCMS?
La cromatografia liquida-spettrometria di massa (LCMS) è una tecnica analitica che combina le capacità di separazione fisica della cromatografia liquida con le capacità di analisi di massa della spettrometria di massa (MS). La cromatografia liquida è una tecnica di separazione e la spettrometria di massa viene utilizzata per analizzare il rapporto massa-carica delle particelle cariche. La separazione fisica è solitamente ottenuta mediante HPLC e, in alternativa, LCMS noto anche come HPLC-MS. LCMS è una tecnica analitica dominante che ha un'accuratezza, sensibilità e specificità molto elevate rispetto all'HPLC. Pertanto, è utile in molte applicazioni come scopi di ricerca, analisi di farmaci, analisi degli alimenti, ecc. LCMS viene utilizzato principalmente per separare, rilevare, identificare e quantificare le proprietà biochimiche di un particolare campione in presenza di miscele chimiche complesse.
Qual è la differenza tra HPLC e LCMC?
Acronimo e definizione di HPLC e LCMC
HPLC: HPLC sta per cromatografia liquida ad alte prestazioni. È una tecnica di separazione utilizzata principalmente per separare i componenti, per identificare e quantificare ogni componente in una miscela.
LCMS: LCMS sta per cromatografia liquida e spettrometria di massa. È una tecnica analitica che combina le capacità di separazione fisica della cromatografia liquida con le capacità di analisi di massa della spettrometria di massa (MS).
Caratteristiche di HPLC e LCMC
Classificazione
HPLC: questo è solo un metodo di cromatografia liquida.
LCMS: Questa è una combinazione del metodo della cromatografia liquida e del metodo della spettrometria di massa.
Efficienza
HPLC: rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno efficiente e più lenta.
LCMS: rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è efficiente e veloce.
Sensibilità
HPLC: rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno sensibile.
LCMS: rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è più sensibile.
Specificità
HPLC: rispetto a LCMS, l'analisi HPLC è meno specifica.
LCMS: rispetto all'HPLC, l'analisi LCMS è più specifica.
Precisione
HPLC: l'HPLC fornisce risultati meno accurati rispetto all'LCMS per la determinazione di alcune sostanze chimiche.
LCMS: LCMS fornisce risultati più accurati rispetto all'HPLC per la determinazione di alcune sostanze chimiche.
Componente
HPLC: l'HPLC può essere considerato un componente di LCMS.
LCMS: LCMS non può essere considerato un componente di HPLC.
Sorgente ionica
HPLC: la sorgente ionica non esiste nello strumento HPLC.
LCMS: la sorgente ionica è presente nello strumento LCMS.
Applicazioni
HPLC: ioni, polimeri, molecole organiche e biomolecole possono essere analizzati utilizzando HPLC.
LCMS: è possibile analizzare molecole organiche e biomolecole. A differenza di HPLC, LCMS può essere utilizzato per esaminare miscele non completamente risolte.
Operazione
HPLC: il diagramma di uno strumento HPLC è riportato nella figura 1 e di solito include un autocampionatore, pompe e un rivelatore. Il campionatore introduce la miscela campione nella fase mobile (miscela pressurizzata di solventi quali acqua, acetonitrile e/o metanolo) che la trasferisce alla colonna. Le pompe forniscono il flusso e la composizione desiderati della fase mobile attraverso la colonna. La colonna viene riempita con l'adsorbente, che è una particella solida granulosa come silice o polimeri. Il rivelatore produce un segnale proporzionato alla quantità di costituente del campione presente nella colonna, consentendo quindi un'analisi quantificabile dei costituenti del campione selezionato. Lo strumento HPLC è controllato e l'analisi dei dati è fornita da un microprocessore digitale e da un software utente.
Figura 1: Schema dello strumento HPLC
LCMS: Lo schema dello strumento LCMS è riportato in figura 2. L'estratto del campione viene inserito nella colonna costituita da HPLC. Questa colonna conserva i metaboliti del campione in base ai caratteri fisici e diversi metaboliti fluiscono allo spettrometro di massa a intervalli di tempo diversi. La spettroscopia di massa viene utilizzata per valutare le masse di particelle, per determinare la disposizione elementare di una molecola e per chiarire le strutture della molecola. Tuttavia, il campione dovrebbe essere ionizzato per generare molecole cariche al fine di determinare i loro rapporti massa-carica. Pertanto, invece degli strumenti HPLC, l'LCMS è costituito da tre moduli aggiuntivi come una sorgente di ferro, un analizzatore di massa e un rilevatore. Una sorgente ionica può trasformare un campione di fase gassosa in ioni e un analizzatore di massa raggruppa gli ioni in base alle loro masse utilizzando campi elettromagnetici. Infine, un rivelatore quantifica i valori e fornisce i dati di ogni ione presente nel campione. La tecnica LCMS può essere utilizzata sia per applicazioni qualitative che quantitative.
Figura 2: Schema dello strumento LCMS
In conclusione, HPLC è un metodo di cromatografia liquida mentre LCMS è una combinazione di cromatografia liquida e spettrometria di massa. Entrambe queste tecniche di analisi hanno caratteristiche diverse, ma possono essere utilizzate per identificare e quantificare composizioni alimentari, prodotti farmaceutici e altre molecole bioattive.
