La differenza fondamentale tra HPLC e HPLC veloce è che la pressione della pompa che utilizziamo per HPLC è di circa 40 MPa mentre la pressione della pompa per HPLC veloce è di circa 3-5 MPa.
La tecnica più comune che utilizziamo per separare i componenti di una miscela è la “cromatografia liquida”. Esistono diverse tecniche per raggiungere questo scopo, di cui l'HPLC è molto popolare. HPLC è l'acronimo di High Performance Liquid Chromatography che identifica, quantifica e separa i componenti di una miscela liquida in modo rapido ed efficiente. Fast HPLC è un'applicazione speciale di HPLC che ha recentemente catturato l'attenzione di coloro che sono coinvolti nello studio delle soluzioni.
Cos'è l'HPLC?
HPLC è la cromatografia liquida ad alte prestazioni. Utilizza un' alta pressione per spingere i solventi in modo che passino attraverso una colonna. Inoltre, è un modo ideale per separare e studiare vari composti come aminoacidi, acidi nucleici, carboidrati, steroidi, antibiotici e idrocarburi. L'HPLC presenta molti vantaggi rispetto ad altri metodi di separazione delle miscele come una risoluzione più elevata e un'analisi più rapida. Elimina la necessità di reimballaggio e rigenerazione e offre un migliore controllo sui parametri, aumentando così l'efficienza della separazione. Idealmente, l'HPLC è adatto per applicazioni su larga scala in quanto può separare particelle molto piccole e consente l'uso di pressioni elevate che facilitano il flusso dei solventi.
Figura 01: Colonna HPLC
In breve, il metodo di funzionamento della tecnica HPLC è il seguente. In primo luogo, dovremmo introdurre il campione nel flusso della fase mobile in piccole quantità discrete usando una pompa. La pressione della pompa deve essere mantenuta a 40 MPa. Questo flusso di fase mobile percola attraverso la colonna di HPLC. Quindi, anche i componenti del campione passano attraverso la colonna. Tuttavia, le loro velocità di movimento differiscono l'una dall' altra a causa della differenza nelle interazioni tra i componenti del campione e l'adsorbente all'interno della colonna. Chiamiamo questo adsorbente come la fase stazionaria perché risiede all'interno della colonna (non in movimento). Quindi, alla fine della colonna, possiamo raccogliere il campione che eluisce dalla colonna, quindi possiamo raccogliere i componenti nel campione separatamente.
Cos'è l'HPLC veloce?
Di recente, i ricercatori dell'istituto di ricerca Schering Plough hanno sviluppato una tecnica HPLC rapida che è una versione avanzata dell'HPLC in quanto consente una separazione ancora più rapida dei composti da una miscela. Inoltre, nota come HPLC veloce, questa tecnica utilizza un nucleo di particelle di silice fuse da 2,7 um ottenute fondendo silice porosa da 0,5 um su una particella di silice solida. Queste particelle realizzate in modo unico rendono la procedura di separazione molto veloce e anche questa a una bassa contropressione rispetto a quella che utilizziamo in HPLC.
Figura 02: Apparato FPLC
L'HPLC veloce ottiene risultati paragonabili all'UPLC, ma gli scienziati ritengono che questa tecnica sia superiore in quanto non richiede apparecchiature ad altissima pressione molto costose. La cosa fantastica è che l'HPLC veloce non richiede nuovi protocolli di laboratorio.
Qual è la differenza tra HPLC e HPLC veloce?
HPLC è la cromatografia liquida ad alte prestazioni e l'HPLC veloce è una forma avanzata di cromatografia liquida ad alte prestazioni. La differenza fondamentale tra HPLC e HPLC veloce è che la pressione della pompa che utilizziamo per HPLC è di circa 40 MPa. Considerando che la pressione della pompa per HPLC veloce è di circa 3-5 MPa. Inoltre, possiamo separare diversi composti come amminoacidi, acidi nucleici, carboidrati, steroidi, antibiotici e idrocarburi utilizzando la tecnica HPLC mentre la tecnica HPLC veloce viene utilizzata principalmente per la separazione delle proteine.
L'infografica qui sotto presenta maggiori informazioni sulla differenza tra HPLC e HPLC veloce.
Riepilogo – HPLC vs HPLC veloce
HPLC è una tecnica di cromatografia liquida che è diventata molto popolare in tutto il mondo. Fast HPLC è una nuova versione di HPLC, i ricercatori dello Schering Plough Institute hanno sviluppato questa nuova tecnica. La differenza fondamentale tra HPLC e HPLC veloce risiede nella pressione della pompa che utilizziamo per la separazione. Questo è; la pressione della pompa che utilizziamo per HPLC è di circa 40 MPa. Ma la pressione della pompa per HPLC veloce è di circa 3-5 MPa.
