Differenza chiave: immunocitochimica vs immunoistochimica
L'immunocitochimica (ICC) e l'immunoistochimica (IHC) sono due tecniche ampiamente utilizzate nella diagnostica molecolare, che identifica e conferma l'insorgenza sia di malattie non trasmissibili che di malattie trasmissibili in base ai marcatori molecolari presenti sulle cellule. La differenza chiave tra immunocitochimica e immunoistochimica è la molecola utilizzata come procedura di analisi in queste tecniche. In ICC vengono utilizzati anticorpi primari e secondari coniugati con marcatori come la fluorescenza mentre per le determinazioni diagnostiche vengono utilizzati anticorpi IHC, monoclonali e policlonali.
Cos'è l'immunocitochimica (ICC)?
ICC utilizza anticorpi primari e secondari legati a marcatori come marcatori fluorescenti o enzimi ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare gli antigeni presenti sulle cellule bersaglio che possono essere particelle cellulari infettive o cellule tumorali cancerose. Per l'immunocitochimica sono necessari tre tipi di controlli.
- Anticorpo primario – controllo che mostra la specificità dell'anticorpo primario che si lega all'antigene
- Anticorpo secondario – controllo che mostra che l'etichetta è specifica per l'anticorpo primario
- Controlli etichetta: mostrano che l'etichettatura è il risultato dell'etichetta aggiunta e non il risultato dell'etichettatura endogena.
Figura 01: L'immunocitochimica etichetta le singole proteine all'interno delle cellule (qui, la tirosina idrossilasi negli assoni dei neuroni simpatici autonomi è mostrata in verde).
Il controllo dell'anticorpo primario è specifico per ogni nuovo anticorpo e non può essere ripetuto per ogni esperimento. Il controllo dell'anticorpo secondario è progettato in base all'anticorpo primario utilizzato nell'esperimento ed è incluso in ogni esperimento. Il controllo dell'etichettatura è incluso se una condizione della procedura viene modificata, il campione viene modificato o quando viene rilevata un'etichettatura imprevista.
Le due principali applicazioni dell'ICC sono Radio Immuno – Assay (RIA) e Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). L'anticorpo più comunemente utilizzato è l'immunoglobulina G.
Cos'è l'immunoistochimica (IHC)?
Nell'immunoistochimica, il campione di origine contiene anticorpi monoclonali e policlonali per determinare la presenza di antigeni nelle cellule estranee. Questa tecnica si basa sulla reazione specifica del legame antigene-anticorpo. Gli anticorpi utilizzati nel rilevamento possono essere contrassegnati con diversi marcatori; possono essere marcatori di fluorescenza, marcatori radiomarcati o marcatori chimici. Agevolando il legame in vitro tra l'antigene e l'anticorpo bersaglio, è possibile determinare la presenza o l'assenza di una particolare proteina di una cellula.
Figura 02: Colorazione immunoistochimica del rene normale con CD10
Attualmente, gli scienziati sono coinvolti nello sviluppo di anticorpi bersaglio per antigeni specifici presenti nelle cellule che possono svilupparsi come cellule tumorali maligne o antigeni presenti in agenti infettivi come l'HIV.
Quali sono le somiglianze tra immunocitochimica e immunoistochimica?
- Le reazioni sono altamente specifiche e accurate in ICC e IHC.
- Le applicazioni di ICC e IHC includono la diagnostica del cancro e delle malattie infettive.
- Le condizioni sterili dovrebbero essere mantenute in entrambe le condizioni e dovrebbero essere eseguite in vitro
- Entrambe le tecniche forniscono risultati riproducibili.
- Entrambi sono rapidi.
- Le tecniche di etichettatura radiofonica e di fluorescenza sono utilizzate come metodi di rilevamento sia in ICC che in IHC.
- Entrambi si basano sull'associazione antigene-anticorpo.
Qual è la differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica?
Immunocitochimica (ICC) vs Immunoistochimica (IHC) |
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| ICC utilizza marcatori primari e secondari legati agli anticorpi come marcatori fluorescenti o enzimi ed è un potente metodo di rilevamento per rilevare gli antigeni presenti sulle cellule bersaglio. | IHC è un metodo che utilizza anticorpi monoclonali e policlonali per determinare la presenza di antigeni che sono speciali marcatori proteici posti sulla superficie cellulare. |
| Sorgente campione | |
| Campioni derivati da tessuti che sono stati elaborati istologicamente in sezioni sottili sono utilizzati in ICC. | IHC utilizza campioni costituiti da cellule cresciute in un monostrato o cellule in sospensione che vengono depositate su un vetrino. |
| Elaborazione del campione | |
| Nell'ICC, le cellule dovrebbero essere permeabili per facilitare la penetrazione degli anticorpi nei bersagli intracellulari. | Nell'IHC, le cellule sono fissate in formalina, incluse in paraffina prima della colorazione. |
Riepilogo – Immunocitochimica vs Immunoistochimica
La diagnostica molecolare viene utilizzata per identificare e confermare l'insorgenza sia di malattie non trasmissibili che di malattie trasmissibili in base ai marcatori molecolari presenti sulle cellule. I marcatori molecolari possono essere proteine o sequenze di DNA o RNA; lo sviluppo di tecnologie come ICC e IHC ha aperto la strada agli scienziati per identificare la malattia e la sua causa in una fase iniziale. Sia l'ICC che l'IHC dipendono dalle reazioni specifiche tra l'anticorpo e l'antigene sebbene la fonte del campione. La principale differenza tra immunocitochimica e immunoistochimica è l'elaborazione del campione delle due procedure.
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