Il differenza fondamentale tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione è quello l'immunoprecipitazione è una tecnica che fa precipitare una proteina dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico, mentre la coimmunoprecipitazione è una tecnica che precipita i complessi proteici intatti dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico.
L'interazione antigene-anticorpo è un'interazione chimica specifica tra gli anticorpi prodotti dai linfociti B e gli antigeni (proteine) durante una reazione immunitaria. Normalmente, gli antigeni solubili si combinano con gli anticorpi solubili in presenza di un elettrolita a temperatura e pH solubili per formare un complesso visibile insolubile. Questa è chiamata reazione di precipitazione. Pertanto, l'immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di reazioni di precipitazione che vengono abitualmente utilizzate nei laboratori per identificare proteine come gli antigeni.
Cos'è l'immunoprecipitazione?
L'immunoprecipitazione è una tecnica per far precipitare una proteina da una soluzione utilizzando un anticorpo specifico. A volte, questa tecnica è anche nota come immunoprecipitazione proteica individuale. L'immunoprecipitazione utilizza un anticorpo per isolare una proteina selezionata di interesse dal lisato cellulare. L'anticorpo purifica la sua specifica proteina bersaglio o antigene da una miscela. L'anticorpo si lega alla proteina e il complesso anticorpo-antigene viene estratto dal campione. Nella configurazione sperimentale, il complesso antigene-anticorpo viene estratto utilizzando agarosio accoppiato alla proteina A/G o perline magnetiche. Successivamente, le perline vengono lavate e la proteina di interesse viene eluita. La proteina purificata o l'antigene ottenuto mediante immunoprecipitazione viene verificata mediante una varietà di tecniche come il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e il western blot (WB).
Figura 01: Immunoprecipitazione
Inoltre, le proteine o gli antigeni isolati possono essere quantificati e identificati mediante spettrometria di massa utilizzando schemi di digestione enzimatica basati sulla sequenza primaria. Ci sono alcune considerazioni prima di iniziare un esperimento di immunoprecipitazione: scelta del formato del metodo, legame di proteine e microsfere, scelta dell'anticorpo primario e dell'isotipo corretti e controllo negativo.
Cos'è la coimmunoprecipitazione?
La coimmunoprecipitazione è una tecnica per far precipitare i complessi proteici intatti dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico. La coimmunoprecipitazione generalmente funziona selezionando un anticorpo specifico che prende di mira una proteina nota (antigene) che si ritiene sia un membro di un complesso più ampio di proteine. Mirando al membro noto con un anticorpo specifico, è possibile estrarre l'intero complesso proteico dalla soluzione. Ciò consente l'identificazione dei membri sconosciuti del complesso. Il concetto di estrarre i complessi proteici dalla soluzione viene talvolta definito meccanismo di "riduzione".
Figura 02: B Coimmunoprecipitazione
La coimmunoprecipitazione è una potente tecnica utilizzata per analizzare le interazioni proteina-proteina. Lo scopo principale della coimmunoprecipitazione è l'identificazione di partner interagenti come ligandi, cofattori o molecole di segnalazione alla proteina di interesse. Inoltre, la coimmunoprecipitazione è una tecnica efficace che viene utilizzata per separare le proteine dal siero, dal lisato cellulare, dal tessuto omogeneizzato o dai mezzi condizionati.
Quali sono le somiglianze tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione?
- L'immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di tecniche basate sulla reazione alle precipitazioni.
- Entrambe le tecniche possono essere utilizzate per identificare l'antigene bersaglio attraverso un anticorpo specifico.
- Entrambe le tecniche dipendono fortemente dall'interazione antigene-anticorpo.
- Sono usati di routine nei laboratori clinici.
Qual è la differenza tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione?
L'immunoprecipitazione è una tecnica che fa precipitare una proteina dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico, mentre la coimmunoprecipitazione è una tecnica che precipita i complessi proteici intatti dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico. Pertanto, questa è la differenza chiave tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione. Inoltre, l'immunoprecipitazione è più comunemente usata nei laboratori, mentre la coimmunoprecipitazione non è comunemente usata nei laboratori.
L'infografica di seguito presenta le differenze tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione in forma tabellare per un confronto affiancato.
Riepilogo – Immunoprecipitazione vs Coimmunoprecipitazione
L'immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di tecniche basate sulla reazione di precipitazione che dipendono dall'interazione antigene-anticorpo. La tecnica di immunoprecipitazione fa precipitare una proteina dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico, mentre la tecnica di coimmunoprecipitazione fa precipitare i complessi proteici intatti dalla soluzione utilizzando un anticorpo specifico. Quindi, questo riassume la differenza tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione.
