La differenza fondamentale tra CLIA ed ECLIA è che CLIA utilizza un metodo chimico per generare la chemiluminescenza mentre ECLIA utilizza un metodo elettrochimico per generare segnali di chemiluminescenza nella tecnica del dosaggio immunologico.
I test immunologici sono ampiamente utilizzati nell'identificazione e nella quantificazione delle proteine associate a malattie o infezioni. Pertanto, si basano principalmente sul concetto di legame anticorpo-antigene. Esistono molti tipi di test immunologici e i test immunologici chemiluminescenti sono una di queste tecniche di sviluppo emergenti. Sia CLIA che ECLIA utilizzano indicatori chemiluminescenti.
Cos'è CLIA?
Il test immunologico chemiluminescente (CLIA) è un tipo di test immunologico che utilizza una molecola luminescente per il rilevamento. La luminescenza emessa dalla molecola viene rilevata sullo spettrofotometro, generalmente ad una lunghezza d'onda compresa tra 300 – 800 nm. La chemiluminescenza provoca l'eccitazione degli atomi e la tecnica identifica le reazioni chimiche esergoniche come la fonte di energia più adatta per produrre l'eccitazione.
La tecnica CLIA si svolge in due metodi principali: tecnica CLIA diretta e tecnica CLIA indiretta. La tecnica CLIA diretta utilizza marcatori luminofori diretti che sono legati al bersaglio, mentre il metodo CLIA indiretto utilizza marcatori enzimatici. I marcatori diretti del luminoforo includono gli esteri dell'acido e del rutenio mentre i marcatori indiretti includono la fosfatasi alcalina con substrato di adamantil 1, 2-diossano aril fosfato (AMPPD) e la perossidasi di rafano con luminolo o suoi derivati come substrato.
Figura 01: Chemiluminescenza
I vantaggi chiave di CLIA sono l'ampia gamma dinamica di funzionalità, l'elevata intensità nell'erogazione del segnale, l'assenza di interferenze di fondo, l'elevata specificità, la rapidità, la stabilità e la compatibilità con diversi protocolli di analisi. Al contrario, il loro costo elevato e le limitazioni relative al rilevamento dell'antigene e ai pannelli di test sono gli svantaggi di CLIA.
Cos'è ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) è una nuova tecnica di sviluppo di immunodosaggio che utilizza il concetto di elettrochemiluminescenza. Nel concetto di elettroluminescenza, gli intermedi si generano elettrochimicamente. Questi intermedi generati elettronicamente raggiungono quindi uno stato eccitato e provocano l'emissione di luce. La lunghezza d'onda in cui viene emessa la luce corrisponde al gap energetico. La chemiluminescenza viene quindi prodotta a causa della produzione elettrochimica di uno o più reagenti sull'elettrodo.
ECLIA è un'utile applicazione analitica con elevata sensibilità e specificità. Viene utilizzato principalmente per identificare le proteine legate a diverse condizioni patologiche e mediche. I suoi principali vantaggi includono una gamma dinamica più ampia, versatilità, controllo spaziale e temporale mediante l'applicazione di potenziali elettrodi, elevata sensibilità fino a intervalli picomolari. Tuttavia, il fatto che richieda una gestione esperta e l' alto costo associato sono i suoi svantaggi.
Quali sono le somiglianze tra CLIA ed ECLIA?
- Entrambe le tecniche si basano sul concetto di legame antigene-anticorpo.
- Inoltre, entrambi vengono utilizzati principalmente per la diagnostica della malattia basata sulla quantificazione delle proteine.
- Entrambi sono metodi kit sensibili e specifici.
- Usano il concetto di chemiluminescenza per il rilevamento.
- Possono essere automatizzati.
- Entrambi richiedono uno spettrofotometro per il rilevamento.
- Entrambi hanno un'ampia gamma dinamica.
- Sono tecniche costose.
Qual è la differenza tra CLIA ed ECLIA?
CLIA è una tecnica di immunodosaggio che utilizza la teoria della chemiluminescenza, mentre ECLIA è una tecnica di immunodosaggio che utilizza la teoria dell'elettrochimica accoppiata alla chemiluminescenza. Quindi, questa è la differenza chiave tra CLIA ed ECLIA. Pertanto, CLIA utilizza reazioni chimiche che portano allo sviluppo di segnali chemiluminescenti, mentre ECLIA utilizza reazioni elettrochimiche che portano allo sviluppo di segnali chemiluminescenti.
L'infografica qui sotto della differenza tra CLIA ed ECLIA mostra più confronti tra entrambe le tecniche.
Riepilogo – CLIA vs ECLIA
CLIA ed ECLIA sono entrambe tecniche che svolgono un ruolo importante nella diagnostica delle malattie. Sono metodi avanzati di immunodiagnostica basati sul concetto di legame anticorpo-antigene. La differenza chiave tra CLIA ed ECLIA è il metodo di generazione della chemiluminescenza. Mentre CLIA utilizza reazioni chimiche per generare chemiluminescenza in seguito al legame anticorpo-antigene, ECLIA utilizza reazioni elettrochimiche per generare chemiluminescenza. Tuttavia, entrambe le tecniche sono rapide e specifiche.
