La differenza chiave tra pBR322 e pUC19 è che pBR322 è un vettore plasmidico lungo 4361 paia di basi, mentre pUC19 è un vettore plasmidico lungo 2686 paia di basi.
Un vettore di clonazione è un piccolo frammento di DNA che può essere mantenuto stabilmente in un organismo. È anche un piccolo pezzo di DNA in cui è possibile inserire un frammento di DNA estraneo a scopo di clonazione. Un vettore contiene caratteristiche importanti che consentono il comodo inserimento di un frammento di DNA estraneo nei vettori, come siti di restrizione, un marcatore selezionabile, gene reporter ed elemento di espressione. La clonazione è stata eseguita per la prima volta utilizzando E.coli. I vettori di clonazione per E. coli includono plasmidi, batteriofagi, cosmidi e cromosomi artificiali batterici (BAC). I vettori più comunemente usati sono i plasmidi geneticamente modificati. pBR322 e pUC19 sono due tipi di vettori plasmidici.
Cos'è pBR322?
pBR322 è un vettore plasmidico. È uno dei primi vettori di clonazione ampiamente utilizzati per E. coli. Questo vettore è stato creato per la prima volta nel 1977 nel laboratorio di Herbert Boyer presso l'Università della California, San Francisco. È un DNA circolare a doppio filamento lungo 4361 paia di basi.
Figura 01: pBR322
Questo vettore plasmidico ha caratteristiche speciali. Normalmente, ha due geni di resistenza agli antibiotici: il gene bla che codifica per la proteina di resistenza all'ampicillina (AmpR) e il gene tetA che codifica per la resistenza alle tetracicline (TetR) proteine. Inoltre, contiene l'origine della replica di pMB1. Questo vettore plasmidico ha anche un gene rop che codifica per un limitatore del numero di copie del plasmide. Inoltre, questo vettore ha siti di restrizione unici per più di 40 enzimi di restrizione. Undici di questi quaranta siti di restrizione si trovano all'interno di TetR gene. Esistono due siti di restrizione per gli enzimi di restrizione HindIII e ClaI all'interno del promotore del gene TetR . Inoltre, ci sono sei siti di restrizione molto importanti all'interno del gene AmpR. pBR322 è un vettore di clonazione a basso numero di copie. Fornisce circa 20 copie di plasmidi per cellula batterica. Il peso molecolare del vettore è 2,83×106 d altons.
Cos'è pUC19?
pUC19 è un vettore plasmidico lungo 2686 paia di basi. È una delle serie di vettori plasmidici creati da Joachim Messing e collaboratori. Il primo lavoro su questa serie di plasmidi è stato condotto presso l'Università della California. È un DNA circolare a doppio filamento.
Figura 02: pUC19
Questo vettore plasmidico contiene anche caratteristiche importanti. Ha un frammento terminale N del gene β glattosidasi (lacz). Ha anche una regione MCS (Multiple Cloning Site). Questa regione è suddivisa nei codoni 6 e 7 del gene lacz. La regione MCS fornisce molti siti di restrizione delle endonucleasi di restrizione. Oltre al gene della β glattosidasi, pUC19 codifica anche per un gene di resistenza all'ampicillina (AmpR). Inoltre, l'origine della replicazione deriva dal plasmide pMB1. Sebbene pUC19 sia di piccole dimensioni, ha un numero di copie elevato (500-700 copie per cellula batterica). Il peso molecolare di questo vettore plasmidico è 1,75×106 d altons.
Quali sono le somiglianze tra pBR322 e pUC19?
- pBR322 e pUC19 sono due tipi di vettori plasmidici.
- Sono vettori di clonazione popolari per coli.
- Entrambi i vettori plasmidici hanno la stessa origine della forma replicativa del plasmide pMB1.
- Questi vettori hanno più siti di restrizione.
- Entrambi i vettori plasmidici hanno un gene di resistenza all'ampicillina come marcatore selezionabile.
Qual è la differenza tra pBR322 e pUC19?
pBR322 è un vettore plasmidico lungo 4361 paia di basi, mentre pUC19 è un vettore plasmidico lungo 2686 paia di basi. Pertanto, questa è la differenza chiave tra pBR322 e pUC19. Inoltre, pBR322 è un vettore plasmidico a basso numero di copie, mentre pUC19 è un vettore plasmidico ad alto numero di copie.
L'infografica di seguito presenta le differenze tra pBR322 e pUC19 in forma tabellare per un confronto affiancato.
Riepilogo – pBR322 vs pUC19
I vettori di clonazione più comunemente usati per E.coli sono plasmidi geneticamente modificati.pBR322 e pUC19 sono due tipi di vettori plasmidici. pBR322 è un vettore plasmidico lungo 4361 paia di basi, mentre pUC19 è un vettore plasmidico lungo 2686 paia di basi. Quindi, questa è la differenza chiave tra pBR322 e pUC19.