La differenza chiave tra la spettroscopia UV-vis e quella di fluorescenza è quella la spettroscopia UV-visibile misura l'assorbimento della luce nell'intervallo UV-visibile, mentre la spettroscopia di fluorescenza misura la luce emessa da un campione nell'intervallo di fluorescenza dopo aver assorbito la luce a alta energia rispetto al livello di energia emessa.
La spettroscopia è una tecnica per la misurazione dell'assorbimento e dell'emissione di luce e altre radiazioni da parte della materia.
Cos'è la spettroscopia UV-Vis?
La spettroscopia del visibile UV è una tecnica analitica che utilizza l'assorbimento o la riflettanza di una parte della gamma UV e completa le regioni visibili adiacenti dello spettro elettromagnetico. Questa tecnica è disponibile in due tipi; sono la spettroscopia di assorbimento e la spettroscopia di riflettanza. Utilizza la luce nelle gamme visibili e adiacenti.
In genere, l'assorbimento o la riflettanza della gamma visibile della luce può influenzare direttamente il colore percepito delle sostanze chimiche coinvolte nel processo. A questo intervallo dello spettro, possiamo osservare che atomi e molecole possono subire transizioni elettroniche. Qui, la spettroscopia di assorbimento è complementare alla spettroscopia di fluorescenza, dove la fluorescenza si occupa delle transizioni di elettroni dallo stato eccitato allo stato fondamentale. Inoltre, l'assorbimento misura le transizioni dallo stato fondamentale allo stato eccitato.
Figura 01: Spettroscopia UV Visibile
Questa tecnica spettroscopica è utile per analizzare quantitativamente diversi campioni, come ioni di metalli di transizione, composti organici altamente coniugati e macromolecole nei sistemi biologici. In genere, l'analisi spettroscopica viene eseguita utilizzando soluzioni, ma possiamo anche utilizzare solidi e gas.
Cos'è la spettroscopia di fluorescenza?
La spettroscopia di fluorescenza è un tipo di spettroscopia elettromagnetica utile per analizzare la fluorescenza da un campione. Questa tecnica prevede l'uso di un raggio di luce (come gli UV) per eccitare gli elettroni nelle molecole di alcuni composti e può indurli a emettere luce. Tipicamente, questa emissione è luce visibile ma non necessariamente la stessa.
Figura 02: Spettroscopia di fluorescenza
In genere, le molecole hanno stati diversi noti come livelli di energia. Questa tecnica riguarda principalmente gli stati elettronici e vibrazionali. Spesso, il campione di analita ha molecole in uno stato elettronico fondamentale e uno stato eccitato di energia superiore. Questi due stati elettronici hanno vari stati vibrazionali tra di loro. Durante il processo di fluorescenza, le specie chimiche vengono eccitate assorbendo fotoni e si spostano da uno stato fondamentale a un livello di energia più elevato. Successivamente, le collisioni tra altre molecole fanno sì che le molecole eccitate perdano energia vibrazionale fino a raggiungere uno stato vibrazionale basso da questo stato eccitato. Questo emette fotoni con diverse energie e diverse frequenze. Questo è chiamato fluorescenza. Possiamo analizzare queste diverse frequenze emesse in questo modo per determinare i diversi livelli vibrazionali.
Qual è la differenza tra spettroscopia UV Vis e fluorescenza?
Le tecniche spettroscopiche sono utili per studiare le proprietà di diverse sostanze chimiche. Il differenza fondamentale tra la spettroscopia UV-vis e la spettroscopia di fluorescenza è quello la spettroscopia UV-visibile misura l'assorbimento della luce nell'intervallo UV-visibile, mentre la spettroscopia di fluorescenza misura la luce emessa da un campione nell'intervallo di fluorescenza dopo aver assorbito la luce ad alta energia rispetto a quella emessa livello di energia. Inoltre, la spettroscopia di fluorescenza è più sensibile della spettroscopia UV-visibile.
L'infografica di seguito presenta le differenze tra la spettroscopia UV vis e fluorescenza in forma tabellare per un confronto fianco a fianco.
Riepilogo – Spettroscopia UV Vis vs fluorescenza
La spettroscopia è un'importante tecnica analitica. Esistono diversi tipi di spettroscopia, come la spettroscopia IR, la spettroscopia UV visibile, la spettroscopia di fluorescenza, ecc. la spettroscopia misura la luce emessa da un campione nell'intervallo di fluorescenza dopo aver assorbito luce ad alta energia rispetto al livello di energia emessa.
