La differenza fondamentale tra la microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale è che nella microscopia a fluorescenza, l'intero campione viene inondato uniformemente di luce da una sorgente luminosa, mentre nella microscopia confocale, solo alcuni punti del campione sono esposti alla luce da una sorgente luminosa sorgente luminosa.
La microscopia a fluorescenza è un'importante tecnica analitica utile per studiare le proprietà di sostanze organiche o inorganiche. La microscopia confocale è una tecnica analitica utile per aumentare la risoluzione ottica e il contrasto di una micrografia utilizzando un foro stenopeico spaziale per bloccare la luce sfocata nella formazione dell'immagine.
Cos'è la microscopia a fluorescenza?
La microscopia a fluorescenza è un'importante tecnica analitica utile per studiare le proprietà di sostanze organiche o inorganiche. Lo strumento che utilizziamo per questa misurazione è un microscopio a fluorescenza. È un tipo di microscopio ottico. Questo tipo di microscopio ottico utilizza la fluorescenza invece di diffusione, riflessione, attenuazione e assorbimento o in aggiunta ad essi.
Un microscopio a fluorescenza utilizza la fluorescenza per generare un'immagine. Potrebbe essere una configurazione semplice come un microscopio a epifluorescenza o un design più complicato, incluso un microscopio confocale che utilizza il sezionamento ottico. Questo aiuta a ottenere una migliore risoluzione dell'immagine a fluorescenza.
Figura 01: un microscopio a fluorescenza
Quando si considera il principio della microscopia a fluorescenza, dovremmo usare il campione per l'illuminazione con luce di una lunghezza d'onda specifica. Lì, il campione assorbe la luce dai fluorofori che li fa emettere luce di lunghezze d'onda maggiori. È importante separare la luce illuminata dalla fluorescenza emessa molto più debole attraverso l'uso di un filtro di emissione spettrale.
In genere, un microscopio a fluorescenza contiene una sorgente luminosa, un filtro di eccitazione, uno specchio dicroico e un filtro di emissione. La sorgente luminosa può essere una lampada ad arco allo xeno, una lampada a vapori di mercurio, LED e laser. Lo specchio dicroico è anche noto come divisore dicroico.
Cos'è la microscopia confocale?
La microscopia confocale è una tecnica analitica utile per aumentare la risoluzione ottica e il contrasto di una micrografia utilizzando un foro stenopeico spaziale per bloccare la luce sfocata nella formazione dell'immagine. È anche noto come microscopia a scansione laser confocale o microscopia a scansione confocale laser. È una tecnica di imaging ottico.
In questa tecnica microscopica, l'acquisizione di più immagini 2D a diverse profondità in un campione consente la ricostruzione di strutture 3D all'interno di un oggetto. La tecnica microscopica confocale è ampiamente utile nelle comunità scientifiche e industriali. Viene generalmente utilizzato nelle scienze della vita, nell'ispezione dei semiconduttori e nelle scienze dei materiali.
Figura 02: Il principio del sensore del punto confocale dal brevetto di Minsky
Durante il processo, la luce viaggia attraverso il campione sotto un microscopio convenzionale fino a quanto potrebbe penetrare nel campione, mentre un microscopio confocale che focalizza solo un raggio di luce più piccolo passa attraverso un livello di profondità ristretto alla volta. Questa tecnica è stata sviluppata da Marvin Minsky nel 1957.
Qual è la differenza tra la microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale?
La microscopia a fluorescenza è un'importante tecnica analitica utile per studiare le proprietà di sostanze organiche o inorganiche. La microscopia confocale è una tecnica analitica utile per aumentare la risoluzione ottica e il contrasto di una micrografia utilizzando un foro stenopeico spaziale per bloccare la luce sfocata nella formazione dell'immagine. Il differenza fondamentale tra la microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale è che nella microscopia a fluorescenza, l'intero campione viene inondato uniformemente di luce da una sorgente luminosa, mentre nella microscopia confocale, solo alcuni punti del campione sono esposti alla luce da una sorgente luminosa.
L'infografica di seguito presenta le differenze tra la microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale in forma tabellare per un confronto fianco a fianco.
Riepilogo – Microscopia a fluorescenza vs microscopia confocale
La microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale sono due tecniche analitiche coinvolte nell'imaging ottico. Il differenza fondamentale tra la microscopia a fluorescenza e la microscopia confocale è che nella microscopia a fluorescenza, l'intero campione viene inondato uniformemente di luce da una sorgente luminosa, mentre nella microscopia confocale, solo alcuni punti del campione sono esposti alla luce da una sorgente luminosa.
