Il differenza fondamentale tra la cromatografia a scambio ionico e la cromatografia ad esclusione dimensionale è che la cromatografia a scambio ionico viene utilizzata per analizzare le sostanze ioniche in base alla carica mentre la cromatografia ad esclusione dimensionale viene utilizzata per analizzare molecole di grandi dimensioni in base alle dimensioni.
La cromatografia è una tecnica analitica che può essere utilizzata per analizzare miscele diverse. Le tecniche cromatografiche sono denominate in base al parametro utilizzato per analizzare le sostanze – ad es. cromatografia ad esclusione dimensionale, cromatografia a scambio ionico, ecc.
Cos'è la cromatografia a scambio ionico?
La cromatografia a scambio ionico è una tecnica analitica in cui possiamo analizzare sostanze ioniche. È spesso utile analizzare anioni e cationi inorganici (cioè anioni cloruro e nitrato e potassio, cationi sodio). Sebbene non sia un metodo molto comune, possiamo analizzare gli ioni organici utilizzandolo. Inoltre, possiamo utilizzare questa tecnica per la purificazione delle proteine perché le proteine sono molecole cariche a determinati valori di pH. Qui, utilizziamo una fase stazionaria solida a cui le particelle cariche possono attaccarsi. Ad esempio, possiamo utilizzare i copolimeri resina polistirene-divinilbenzene come supporto solido.
Figura 01: Teoria alla base della cromatografia a scambio ionico
Per spiegare ulteriormente questo, la fase stazionaria ha ioni fissi come anioni solfato o cationi amminici quaternari. Ognuno di questi dovrebbe associarsi a un controione (uno ione con carica opposta) se vogliamo mantenere la neutralità di questo sistema. Se il controione è un catione, chiamiamo il sistema una resina a scambio cationico. Ma se il controione è un anione, il sistema è una resina a scambio anionico. Inoltre, ci sono cinque fasi principali nella cromatografia a scambio ionico:
- Fase iniziale
- Adsorbimento del target
- Inizio dell'eluizione
- Fine dell'eluizione
- Rigenerazione
Cos'è la cromatografia ad esclusione dimensionale?
La cromatografia ad esclusione dimensionale o SEC è una tecnica analitica in cui le molecole in una miscela possono essere separate in base alle dimensioni e al peso della molecola. Di solito, funziona con grandi molecole chiamate macromolecole. Tipicamente, per l'analisi viene utilizzata una soluzione acquosa. Quindi è chiamata cromatografia a filtrazione su gel. Quando è un solvente organico, viene chiamato cromatografia a permeazione di gel.
La cromatografia con filtrazione su gel è una forma di cromatografia ad esclusione dimensionale in cui utilizziamo una soluzione acquosa come fase mobile. Pertanto, la fase mobile che utilizziamo spesso in questa tecnica è un tampone acquoso. Inoltre, utilizziamo una colonna cromatografica per questa separazione e dobbiamo imballare la colonna con perline porose. Di solito, Sephadex e agarosio sono utili come materiale poroso. Quindi, questi materiali sono la fase stazionaria del nostro esperimento. Inoltre, possiamo utilizzare la dimensione dei pori di queste perline per determinare la dimensione delle macromolecole che stiamo separando. Tuttavia, è solo una stima.
Figura 02: Un apparato per la cromatografia ad esclusione dimensionale
La cromatografia a permeazione di gel è una forma di cromatografia ad esclusione dimensionale in cui utilizziamo un solvente organico come fase mobile. Pertanto, possiamo utilizzare soluzioni come esano e toluene per questo scopo. La fase stazionaria è un materiale poroso, lo stesso della cromatografia a filtrazione su gel. Questa tecnica viene spesso applicata a polimeri e altri materiali organici solubili. Il metodo di azione della tecnica è simile a quello della cromatografia a filtrazione su gel.
Qual è la differenza tra lo scambio ionico e la cromatografia ad esclusione dimensionale?
La cromatografia è una tecnica analitica che può essere utilizzata per analizzare miscele diverse. Il differenza fondamentale tra cromatografia a scambio ionico e cromatografia a esclusione dimensionale è quello la cromatografia a scambio ionico viene utilizzata per analizzare le sostanze ioniche in base alla carica mentre la cromatografia a esclusione dimensionale viene utilizzata per analizzare molecole di grandi dimensioni in base alle dimensioni.
Qui sotto l'infografica fornisce maggiori informazioni sulla differenza tra la cromatografia a scambio ionico e quella ad esclusione dimensionale.
Riepilogo – Cromatografia a scambio ionico e cromatografia ad esclusione dimensionale
La cromatografia è una tecnica analitica che può essere utilizzata per analizzare miscele diverse. Il differenza fondamentale tra cromatografia a scambio ionico e cromatografia a esclusione dimensionale è quello la cromatografia a scambio ionico viene utilizzata per analizzare le sostanze ioniche in base alla carica mentre la cromatografia a esclusione dimensionale viene utilizzata per analizzare molecole di grandi dimensioni in base alle dimensioni.
