La differenza fondamentale tra l'isolamento del DNA e dell'RNA è che l'isolamento del DNA è una procedura in cui un tipo di acido nucleico chiamato DNA viene estratto da una cellula biologica, mentre l'isolamento dell'RNA è una procedura in cui un tipo di acido nucleico chiamato RNA è estratto da una cellula biologica.
L'isolamento dell'acido nucleico è il punto di partenza in una vasta gamma di applicazioni a valle. L'elevata qualità degli acidi nucleici nei campioni di partenza è un fattore chiave per il successo delle successive applicazioni a valle. L'isolamento dell'acido nucleico potrebbe essere definito come una serie di passaggi per ottenere l'acido nucleico in un campione di purezza che può essere utilizzato per diverse fasi dell'applicazione a valle. Lo scopo dell'estrazione dell'acido nucleico è di disintegrare la membrana cellulare e ottenere la massima eliminazione di lipidi e proteine per ottenere acidi nucleici puri come DNA o RNA.
Cos'è l'isolamento del DNA?
L'isolamento del DNA è una procedura di routine in cui un tipo di acido nucleico chiamato DNA viene estratto da una cellula biologica. L'isolamento del DNA viene eseguito estraendo il DNA da sangue, campioni di tessuto congelato e blocchi di tessuto di paraffina. Ci sono tre fasi principali nell'isolamento del DNA, inclusa la lisi cellulare, l'estrazione del DNA e la precipitazione. Nella lisi cellulare, le cellule in un campione vengono separate l'una dall' altra spesso con mezzi fisici come la macinazione o il vortice e poste in una soluzione contenente sale. Di solito, gli ioni sodio caricati positivamente nel sale aiutano a proteggere i gruppi fosfato caricati negativamente che corrono lungo la spina dorsale del DNA. Successivamente, viene aggiunto un detergente per abbattere i lipidi nella membrana cellulare e nei nuclei, che rilasciano il DNA quando queste membrane vengono interrotte.
Figura 01: Isolamento del DNA
L'estrazione del DNA viene eseguita per ottenere un campione pulito di DNA. Spesso viene aggiunto un enzima proteasi per degradare le proteine associate al DNA e altre proteine cellulari. Inoltre, alcuni dei detriti cellulari possono essere rimossi filtrando il campione. Infine, il DNA viene precipitato utilizzando l'alcol. Inoltre, se c'è molto DNA, si può osservare un avaro precipitato bianco alla fine della procedura.
Cos'è l'isolamento dell'RNA?
L'isolamento dell'RNA è una procedura in cui un tipo di acido nucleico chiamato RNA viene estratto da una cellula biologica. Questa procedura è spesso complicata dalla presenza di enzimi ribonucleasici nelle cellule e nei tessuti che degradano l'RNA. Diversi metodi sono utilizzati in biologia molecolare per isolare l'RNA dai campioni, come l'estrazione di guanidinio-tiocianato-fenolo-cloroformio.
Figura 02: Isolamento dell'RNA
L'isolamento dell'RNA di solito consiste in diversi passaggi, tra cui la lisi cellulare e l'omogeneizzazione, l'estinzione dei processi biochimici, la partizione dell'acido nucleico, il recupero dell'RNA, la purificazione grezza e la valutazione della qualità dell'RNA. Il metodo di lisi ed eluizione basato su carta da filtro ha un'elevata capacità di throughput nell'estrazione dell'RNA. Inoltre, anche l'estrazione dell'RNA in azoto liquido mediante mortaio e pestello è un metodo molto utile in quanto previene l'attività della ribonucleasi.
Quali sono le somiglianze tra l'isolamento del DNA e dell'RNA?
- L'isolamento del DNA e dell'RNA sono due tipi di procedure di isolamento degli acidi nucleici.
- Entrambe le procedure hanno passaggi di base simili, come la lisi cellulare, l'estrazione e la purificazione.
- Queste procedure isolano importanti tipi di acidi nucleici che hanno una serie di applicazioni a valle.
- Sono eseguiti in allestimenti di laboratorio.
- Possono essere eseguiti utilizzando kit fabbricati.
Qual è la differenza tra l'isolamento del DNA e dell'RNA?
Nell'isolamento del DNA, un tipo di acido nucleico chiamato DNA viene estratto da una cellula biologica, mentre nell'isolamento dell'RNA, un tipo di acido nucleico chiamato RNA viene estratto da una cellula biologica. Pertanto, questa è la differenza chiave tra l'isolamento del DNA e dell'RNA. Inoltre, l'isolamento del DNA viene normalmente eseguito a un pH compreso tra 7 e 8, mentre l'isolamento dell'RNA viene normalmente eseguito a un pH intorno a 4,5.
L'infografica di seguito presenta le differenze tra l'isolamento del DNA e dell'RNA in forma tabellare per un confronto affiancato.
Riepilogo – Isolamento DNA vs RNA
L'isolamento del DNA e dell'RNA sono due tipi di procedure di isolamento dell'acido nucleico. L'isolamento del DNA è una procedura durante la quale il DNA viene estratto da una cellula biologica. L'isolamento dell'RNA è una procedura durante la quale l'RNA viene estratto da una cellula biologica. Quindi, questa è la differenza chiave tra l'isolamento del DNA e dell'RNA.
