Trasformazione vs Trasfezione
Trasformazione e trasfezione sono due semplici tecniche utilizzate per introdurre un gene estraneo in una cellula ospite. Tuttavia, queste tecniche dipendono dal tipo di sistema host o vettoriale.
Cos'è la trasformazione cellulare?
La trasformazione è la tecnica impiegata per introdurre i geni nei lieviti e nelle cellule batteriche. Questa tecnica di solito provoca cambiamenti ereditari nei geni e quindi l'espressione del gene è permanente. La trasformazione batterica fu introdotta per la prima volta nel 1928 da Frederick Griffith. Poi, all'inizio degli anni '70, questa tecnica è stata utilizzata in E.coli. Durante il processo di trasformazione di E. coli, le cellule vengono immerse in una soluzione ghiacciata di CaCl2 Questo passaggio rende le cellule di E.coli competenti. Successivamente, le cellule competenti vengono mescolate con il DNA plasmidico e vengono incubate in ghiaccio per 20-30 min. Quindi viene somministrato un breve shock termico per consentire il trasferimento del DNA nella cellula. Infine, le cellule vengono poste in un brodo nutriente e incubate a 37 ° C per 60-90 minuti al fine di stabilire i plasmidi. Una volta che questi passaggi sono stati completati con successo, le cellule trasformate possono essere posizionate su un supporto adatto per la propagazione delle cellule. Poiché la trasformazione è considerata una tecnica inefficiente, non può essere utilizzata per la preparazione di banche di cloni.
Cos'è la trasfezione cellulare?
La trasfezione è un metodo di introduzione di un gene estraneo, di solito, nelle cellule dei mammiferi. Esistono due metodi di trasfezione; vale a dire, trasfezione transitoria e trasfezione stabile. Nella trasfezione transitoria, l'espressione genica è disponibile per un tempo limitato; quindi, l' alterazione del gene provoca un'espressione temporanea. Questo metodo di trasfezione è semplice e veloce; quindi può essere utilizzato di routine. Uno svantaggio della trasfezione transitoria è la difficoltà di richiedere sistemi di sintesi proteica su larga scala.
Durante la trasfezione stabile, un gene bersaglio viene integrato nel genoma della cellula ospite, e quindi l'espressione genica è permanente, a differenza della trasfezione transitoria.
Qual è la differenza tra Trasformazione e Trasfezione?
• La trasformazione è l'introduzione di un gene in una cellula procariotica (batterica e lievito), mentre la trasfezione è solitamente chiamata introduzione di un gene in una cellula di mammifero.
• La trasformazione provoca un' alterazione ereditaria, nei geni, mentre la trasfezione può provocare un'espressione temporanea o cambiamenti permanenti nei geni.
