Differenza chiave: trasfezione transitoria vs stabile
La trasfezione è un processo che è coinvolto nel trasferimento genico delle cellule eucariotiche utilizzando metodi chimici o fisici. La trasfezione può essere classificata in due tipi principali denominate trasfezione transitoria e trasfezione stabile. Durante la trasfezione transitoria, il gene di interesse non si integra con il genoma dell'ospite ed è espresso temporalmente all'interno dell'ospite per un breve periodo mentre, nella trasfezione stabile, il gene di interesse si integra con il genoma dell'ospite e si mantiene a lungo termine in diverse generazioni. Questa è la differenza chiave tra trasfezione transitoria e stabile. In entrambi i casi, la trasfezione ha successo e i geni vengono espressi.
Cos'è la trasfezione transitoria?
La trasfezione è uno strumento importante per inserire i geni nelle cellule eucariotiche. Tra i due tipi di trasfezione, la trasfezione transitoria è un modo comune nel trasferimento genico. Attraverso un vettore, i geni estranei vengono trasformati all'interno delle cellule ospiti. Una volta che il DNA estraneo entra nella cellula ospite, ha due opzioni. Può integrarsi con il genoma ospite e replicarsi, oppure rimanere all'interno senza integrarsi nel genoma. La trasfezione transitoria mostra l'espressione temporanea dei geni inseriti senza integrarsi nel genoma ospite. I geni esprimono e producono la proteina codificata fino a quando la cellula non si divide. Tuttavia, a causa dell'impossibilità di integrazione, non può replicarsi ed entrare nelle generazioni future. Questo tipo di trasfezione ha successo per un breve periodo di tempo. Durante la divisione cellulare oa causa di altri fattori, il DNA estraneo viene degradato. La trasfezione transitoria viene mostrata quando il DNA estraneo è sotto forma di DNA altamente avvolto.
Figura 01: Transizione transitoria
Cos'è la trasfezione stabile?
La trasfezione stabile mostra un'integrazione riuscita del gene estraneo nel genoma dell'ospite. Una volta che il DNA estraneo entra all'interno della cellula ospite, parte del DNA estraneo si integra con il genoma ospite e diventa parte di esso. Quindi, anche il DNA estraneo si replica e passa alle generazioni future quando il genoma ospite si replica. Questo tipo di trasfezione è complesso e raro. Tuttavia, a causa della trasfezione stabile nel genoma, questo tratto viene mantenuto per un periodo più lungo di diverse generazioni.
La trasfezione stabile è un processo difficile e richiede un'efficace consegna del DNA e l'acquisizione cellulare del DNA estraneo nel suo genoma. Quindi, il DNA lineare favorisce la trasfezione stabile rispetto al DNA circolare. Tuttavia, il tasso di trasfezione stabile è di circa uno su 104 cellule trasformate. La trasfezione stabile può essere osservata mediante la cotrasformazione di un marker selezionabile e l'esecuzione della selezione artificiale su un mezzo.
Figura 02: trasfezione stabile
Qual è la differenza tra trasfezione transitoria e stabile?
Trasfezione transitoria vs stabile |
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| Il DNA estraneo non si integra nel genoma dell'ospite. | Il DNA estraneo si integra con il genoma dell'ospite e ne diventa parte. |
| Replica all'interno dell'host | |
| I geni transfettati transitori non si replicano all'interno dell'ospite. Pertanto i geni non vengono trasmessi alle generazioni successive. | I geni vengono replicati all'interno dell'ospite e trasmessi alle generazioni future. |
| Durata dell'espressione genica | |
| I geni vengono espressi per un periodo di tempo limitato e successivamente vengono distrutti. | I geni diventano parte del genoma ed espressi all'interno della generazione per un lungo periodo di tempo. |
| Usa | |
| Questo è utile per studiare gli effetti dell'espressione a breve termine di geni o prodotti genici. | Questo è utile per studiare gli effetti delle espressioni geniche a lungo termine. |
| Rilevamento della trasfezione | |
| I geni sono espressi e possono essere facilmente rilevati inserendo un gene reporter. | La trasfezione stabile può essere facilmente rilevata inserendo un marker selezionabile e selezionando tramite selezione artificiale sul supporto. |
| Evento e processo | |
| La trasfezione transitoria è comune e non è complessa da eseguire. | La trasfezione stabile è rara e complessa da eseguire. |
| Natura del DNA | |
| Il DNA altamente super-avvolto è adatto per la trasfezione transitoria. | Il DNA lineare è adatto per la trasfezione stabile. |
| Applicazioni | |
| Questo viene utilizzato per studi di knockdown genico o silenziamento con RNA inibitori, produzione di proteine su piccola scala | Questo viene utilizzato per la produzione di proteine su larga scala, studi farmacologici a lungo termine, terapia genica, ricerca sui meccanismi di regolazione genetica a lungo termine |
Riepilogo – Transfezione transitoria vs stabile
Le trasfezioni transitorie e stabili sono due tipi di trasfezioni mostrate durante il trasferimento del gene nelle cellule eucariotiche da parte di sistemi non virali. Il DNA estraneo trasformato non è integrato con il genoma dell'ospite nella trasfezione transitoria mentre si integra con il genoma dell'ospite nella trasfezione stabile. Il DNA a spirale circolare mostra una trasfezione transitoria mentre il DNA lineare preferisce la trasfezione stabile. Questa è la differenza tra trasfezione transitoria e stabile. Tuttavia, la trasfezione transitoria è più comune e facile rispetto alla trasfezione stabile. Ma la selezione di uno tra due dipende dallo scopo del trasferimento genico e dalla durata del progetto di ricerca.
