La differenza fondamentale tra HPLC e UPLC è che l'HPLC consente l'analisi di particelle con dimensioni di circa 5 micrometri mentre UPLC consente particelle molto più piccole di circa 2 micrometri.
HPLC e UPLC sono entrambe tecniche cromatografiche liquide utili per separare i componenti di un composto. Per conoscere la differenza tra HPLC e UPLC, dobbiamo prima sapere cos'è l'HPLC. Questo perché UPLC è una versione speciale di HPLC e possiamo facilmente capirlo se sappiamo cos'è l'HPLC.
Cos'è l'HPLC?
Il termine HPLC sta per cromatografia liquida ad alte prestazioni. È una tecnica che possiamo usare per separare diversi costituenti di un composto. Inoltre, è la tecnica più utilizzata per identificare, quantificare e separare i componenti di una miscela. Inoltre, questa tecnica utilizza un' alta pressione per spingere i solventi attraverso la colonna. Inoltre, le principali applicazioni dell'HPLC sono in biochimica per l'analisi dei costituenti di un composto. È un modo ideale per la separazione e l'identificazione di amminoacidi, acidi nucleici, proteine, idrocarburi, pesticidi, carboidrati, antibiotici, steroidi e innumerevoli altre sostanze inorganiche.
Figura 01: Sistema HPLC in un laboratorio
In breve, il metodo di funzionamento della tecnica HPLC è il seguente. In primo luogo, dovremmo introdurre il campione nel flusso della fase mobile in piccole quantità discrete usando una pompa. La pressione della pompa deve essere mantenuta a 40 MPa. Quindi, questo flusso di fase mobile percola attraverso la colonna di HPLC. Inoltre, i componenti nel campione passano attraverso la colonna. Tuttavia, le loro velocità di movimento sono diverse l'una dall' altra. Questa differenza è dovuta alla differenza nelle interazioni tra i componenti del campione e l'adsorbente all'interno della colonna. Chiamiamo questo adsorbente come la fase stazionaria perché risiede all'interno della colonna (non in movimento). In secondo luogo, alla fine della colonna, possiamo raccogliere il campione che eluisce dalla colonna. Lì possiamo determinare le differenze nei tempi di ritenzione per ciascun componente nel campione.
Cos'è UPLC?
Il termine UPLC sta per cromatografia liquida ad altissime prestazioni. È una variante dell'HPLC, ma il metodo di funzionamento è lo stesso. Tuttavia, a differenza dell'HPLC, questo metodo consente di analizzare particelle molto piccole, come piccole particelle di 2 micrometri.
Figura 02: Un dispositivo UPLC
Inoltre, fornisce un'analisi più rapida. In questa tecnica, utilizziamo una pressione della pompa di 100 MPa per l'inserimento del campione nella colonna. Quindi, questa alta pressione conferma che l'intero campione viene introdotto nella colonna. Pertanto, questo è molto efficiente rispetto all'HPLC.
Qual è la differenza tra HPLC e UPLC?
Il termine HPLC sta per High Performance Liquid Chromatography mentre il termine UPLC sta per Ultra High Performance Liquid Chromatography. Pertanto, la tecnica UPLC è una versione sviluppata di HPLC. Pertanto, il metodo di funzionamento è lo stesso per entrambe le tecniche. Tuttavia, l'UPLC è più efficiente rispetto all'HPLC perché utilizza un'elevata pressione della pompa; la pressione della pompa per HPLC è 40 MPA mentre è 100 MPa per UPLC. Pertanto, questa è una differenza tra HPLC e UPLC. Soprattutto, la differenza fondamentale tra HPLC e UPLC è che l'HPLC consente l'analisi di particelle con dimensioni di circa 5 micrometri mentre UPLC consente particelle molto più piccole di circa 2 micrometri.
Riepilogo – HPLC vs UPLC
UPLC è una forma di HPLC. Pertanto, i metodi operativi sono gli stessi. Tuttavia, possiamo trovare alcune funzionalità migliorate in UPLC rispetto a HPLC. Pertanto, c'è una certa differenza tra HPLC e UPLC. Tuttavia, la differenza fondamentale tra HPLC e UPLC è che l'HPLC consente l'analisi di particelle con dimensioni di circa 5 micrometri mentre l'UPLC consente particelle molto più piccole di circa 2 micrometri.
