Differenza chiave – RPMI vs DMEM
La maggior parte degli studi di ricerca coinvolge la coltura di cellule animali e, quindi, questi studi richiedono il mantenimento di linee cellulari animali in condizioni di crescita speciali. La coltura di cellule animali è ampiamente utilizzata negli studi farmacologici per identificare il metabolismo dei farmaci, nella diagnostica delle malattie e nella ricerca sul cancro. Il mezzo di coltura cellulare è un aspetto importante della coltura cellulare animale. Il Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) e il Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) sono due mezzi di coltura utilizzati nella coltura di cellule animali. RPMI è un mezzo ampiamente utilizzato per la coltura di cellule di mammifero in coltura in sospensione. Il DMEM è un tipo modificato di mezzo basale, con concentrazioni di aminoacidi e vitamine aumentate fino a quattro volte. DMEM è utilizzato nella coltura di cellule in colture aderenti. La differenza fondamentale tra i due media è il tipo di cultura dei media. RPMI viene utilizzato su colture in sospensione, mentre DMEM viene utilizzato per coltivare cellule aderenti.
Cos'è RPMI?
RPMI o Roswell Park Memorial Institute Medium è anche indicato come RPMI 1640. Il nome del supporto è stato derivato dall'istituto in cui il supporto è stato scoperto. Questo mezzo è comunemente usato nella coltura cellulare animale, in particolare per la crescita delle cellule dei mammiferi. Sono stati originariamente sviluppati per far crescere i linfociti umani.
I seguenti ingredienti sono inclusi nell'RPMI.
- Glucosio
- Indicatore pH (rosso fenolo)\
- Sali (cloruro di sodio, bicarbonato di sodio, fosfato disodico, cloruro di potassio, solfato di magnesio e nitrato di calcio)
- Aminoacidi
- Vitamine (i-inositolo, cloruro di colina, acido para-aminobenzoico, acido folico, nicotinamide, piridossina cloridrato, tiamina cloridrato, pantotenato di calcio, biotina e riboflavina, cianocobalamina)
La particolarità di RPMI è l'aumento della concentrazione di fosfato nel mezzo. RPMI viene utilizzato in un'atmosfera di anidride carbonica al 5%. Ciò fornirà le condizioni massime e ottimali per la crescita cellulare. Il pH del mezzo è mantenuto a 8,0 dal sistema tampone bicarbonato.
Figura 01: Coltura cellulare su una capsula di Petri
Applicazioni di RPMI nella coltura cellulare
- Coltivazione di linfociti T e B umani, cellule del midollo osseo e ibridoma.
- Utilizzato per studiare le cellule neoplastiche umane.
Cos'è DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) è un mezzo modificato che viene preparato commercialmente. La consistenza originale della polvere media è gialla. In DMEM, la concentrazione di vitamine è quadruplicata, aumentando così il contenuto di nutrienti nel mezzo.
DMEM viene anche modificato aggiungendo più sali come nitrato ferrico, piruvato di sodio e alcuni aminoacidi non essenziali come serina e glicina. Anche la formulazione del glucosio nel mezzo è alterata. La formulazione originale è composta da 1000 mg/L di glucosio, mentre nel DMEM la concentrazione viene aumentata fino a 4500 mg/L. DMEM richiede anche l'integrazione di un mezzo sierico in quanto non è un mezzo completo. Molto spesso, DMEM è integrato con Fetal Bovine Serum (FBS). FBS fornisce le proteine e i fattori di crescita necessari per il processo di coltura.
Il pH del mezzo varia con l'aggiunta di bicarbonato di sodio. Il pH del mezzo prima dell'aggiunta di bicarbonato di sodio è di circa 6,80 – 7,40, mentre il pH dopo l'aggiunta di bicarbonato di sodio è compreso tra 7,60 e 8,20. La temperatura di conservazione del mezzo è 2 – 8 0C.
Figura 02: DMEM
Applicazioni di DMEM
- Per studiare la capacità di formare placca del poliomavirus nelle cellule embrionali di topo.
- In studi sull'inibizione del contatto.
- Nella ricerca e analisi colture di cellule di pollo.
Quali sono le somiglianze tra RPMI e DMEM?
- Sia RPMI che DMEM sono utilizzati nella coltura di cellule animali.
- Sia i supporti RPMI che DMEM sono formulazioni liquide.
- Entrambi i mezzi RPMI e DMEM contengono gli amminoacidi essenziali, le vitamine e i sali inorganici necessari per la crescita.
- Entrambi i supporti RPMI e DMEM sono incompleti. Pertanto, è necessario aggiungere il siero.
- Sia i supporti RPMI che DMEM utilizzano il glucosio come fonte di carbonio.
- Sia i supporti RPMI che DMEM hanno un pH più alto.
Qual è la differenza tra RPMI e DMEM?
RPMI vs DMEM |
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| RPMI è un mezzo ampiamente utilizzato per la coltura di cellule di mammifero in una coltura in sospensione. | DMEM è un tipo modificato di terreno basale con una maggiore concentrazione di aminoacidi e vitamine. |
| Presenza di fosfati extra | |
| Presente in RPMI. | Assente in DMEM. |
| Usa | |
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Utilizzato per la coltura di cellule in colture aderenti. È usato per,
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| Tipi di cultura | |
| RPMI viene utilizzato per colture in sospensione. | DMEM viene utilizzato per colture con cellule aderite. |
Riepilogo – RPMI vs DMEM
Sia RPMI che DMEM sono ampiamente utilizzati nella coltura di cellule animali, in particolare per la coltura di linee cellulari animali compresi i linfociti in vitro. DMEM è un mezzo basale modificato in cui vi è una maggiore concentrazione di nutrienti. RPMI sviluppato dal Roswell Park Memorial Institute ed è anche un mezzo utilizzato nella coltura di cellule animali soprattutto per i linfociti dei mammiferi. Entrambi i media sono disponibili in commercio. Questa è la differenza tra RPMI e DMEM.
