Differenza chiave: colorazione di Gram vs cultura
La colorazione di Gram è una tecnica di colorazione che viene eseguita per differenziare i batteri in due gruppi in base allo spessore dello strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare. La coltura è un metodo per coltivare e mantenere i microrganismi in condizioni di laboratorio per diverse analisi. La differenza chiave tra la colorazione dei grammi e la coltura è la loro funzione; ceppo di grammo una tecnica di colorazione dei batteri in cui la coltura è un metodo per far crescere e mantenere i microrganismi.
Cos'è la colorazione di Gram?
La colorazione di Gram è un'importante tecnica di colorazione differenziale utilizzata per l'identificazione batterica in microbiologia. Questa tecnica è stata introdotta dal batteriologo danese Hans Christian Gram nel 1884. La colorazione Gram classifica i batteri in due gruppi principali: gram positivi e gram negativi; questi sono molto importanti nella classificazione e identificazione batterica. La colorazione di Gram viene eseguita come passaggio iniziale per la caratterizzazione batterica.
I batteri sono raggruppati in base alle differenze nella loro parete cellulare. I batteri Gram-positivi contengono uno spesso strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare mentre i batteri Gram-negativi contengono un sottile strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare, come mostrato nella figura 01. Il risultato della colorazione di Gram sarà basato sulla differenza di spessore nello strato di peptidoglicano del parete cellulare.
Figura 1: Batteri Gram positivi e Gram negativi
La colorazione di Gram viene eseguita utilizzando quattro diversi reagenti, vale a dire; colorante primario, mordente, decolorante e controcolorante. Il cristalvioletto e la safranina servono rispettivamente come coloranti primari e di contrasto, mentre lo iodio grammi e l'alcol al 95% servono rispettivamente come mordente e decolorante.
Passaggi di base della colorazione di Grams
- Uno striscio batterico viene preparato su un vetrino pulito, fissato a caldo e raffreddato.
- Lo striscio viene inondato di violetto cristallino per 1 – 2 minuti.
- Lo striscio viene risciacquato con acqua del rubinetto a flusso lento per rimuovere le macchie in eccesso.
- Grams iodio viene applicato sullo striscio per 1 minuto.
- Lo striscio viene risciacquato con acqua del rubinetto che scorre lentamente
- Lo striscio viene lavato con alcol al 95% per 2-5 secondi e risciacquato con acqua del rubinetto a flusso lento.
- Lo striscio viene macchiato con safranina per 1 minuto
- Lo striscio viene risciacquato con acqua di rubinetto che scorre lentamente, asciugato e osservato al microscopio.
Alla fine della colorazione di gram, i batteri gram negativi saranno osservati in colore rosa mentre i batteri gram positivi saranno osservati in colore viola, come mostrato nella Figura 02. Il risultato della colorazione di grammi è deciso dallo spessore dello strato di peptidoglicano nella loro parete cellulare. Durante la fase di decolorazione, il colorante primario e il mordente vengono facilmente rimossi dai batteri gram negativi e diventano incolori poiché hanno un sottile strato di peptidoglicano. La colorazione primaria viene trattenuta nei batteri gram-positivi poiché hanno uno spesso strato di peptidoglicano. La colorazione di contrasto non sarà efficace per i batteri gram-positivi a causa della ritenzione della colorazione primaria. Quindi i batteri gram positivi saranno visibili nel colore della macchia primaria, cioè il colore viola. La contromacchia macchia i batteri gram-negativi e sarà visibile nel colore del plettro che è il colore della safranina. Quindi, è facile classificare i batteri in due gruppi in base alla colorazione del grammo ed è prezioso nella differenziazione e identificazione batterica.
Figura 2: Ceppo Gram
Cos'è la cultura?
La coltura microbica è un metodo per coltivare e mantenere i microrganismi in condizioni di laboratorio per scopi diversi. Le colture vengono coltivate in terreni solidi, semisolidi e liquidi in base al tipo e allo scopo della coltura del microrganismo. Le colture sono fornite dei nutrienti necessari e delle condizioni di crescita richieste dai microrganismi. Esistono diversi componenti di un mezzo di coltura come fonte di energia, fonte di carbonio, fonte di azoto, minerali, micronutrienti, acqua, agente solidificante, ecc. La temperatura ottimale, l'ossigeno e il pH devono essere regolati in base al tipo di microrganismo coltivato.
Ci sono diversi tipi di colture microbiche; ad esempio, coltura in batch, coltura continua, coltura per coltellate, coltura in piastra di agar, coltura in brodo, ecc. A seconda della composizione del terreno di coltura, esistono diversi tipi di terreni di coltura noti come terreni sintetici, terreni semisintetici e terreni naturali. Le colture microbiche vengono preparate in condizioni sterili all'interno di una camera speciale chiamata flusso d'aria laminare. Il terreno di coltura e la vetreria vengono sterilizzati prima dell'inoculazione del microrganismo desiderato. In condizioni sterili adeguate, il microrganismo bersaglio viene trasferito nel mezzo nutritivo sterilizzato e incubato a temperatura ottimale. All'interno del terreno, il microrganismo crescerà e si moltiplicherà utilizzando i nutrienti forniti.
Figura 3: una coltura batterica su piastra
Qual è la differenza tra la colorazione di Gram e la coltura?
Macchia di Gram vs Cultura |
|
| Il ceppo Grams è una tecnica di colorazione differenziale utilizzata per la differenziazione e l'identificazione batterica. | La coltura microbica è un metodo per coltivare microrganismi in laboratorio. |
| Componenti | |
| Questo utilizza diversi reagenti, tra cui due coloranti. | Questo utilizza diversi mezzi di coltura come mezzi solidi, semisolidi e liquidi composti da sostanze nutritive e altre condizioni necessarie. |
| Funzioni di base | |
| Questo permette di raggruppare i batteri in due gruppi: grammi negativi e grammi positivi. | Ciò consente la moltiplicazione di microrganismi per scopi diversi. |
| Base | |
| Il risultato della colorazione di Gram si basa sulle differenze nello strato di peptidoglicano della parete cellulare. | I microrganismi cresceranno e si moltiplicheranno all'interno del terreno di coltura. |
| Risultato | |
| I batteri Gram negativi sono visibili in colore rosa e i batteri Gram positivi sono visibili in colore viola. | Sulle piastre si possono vedere colonie di microrganismi. Sui mezzi liquidi, i microrganismi sono in forma sospesa. |
Riepilogo – Colorazione di Gram vs Cultura
Le colture microbiche vengono preparate e mantenute in condizioni di laboratorio per scopi diversi come conservazione, analisi, purificazione chimica, ecc. La colorazione di Grams è una procedura di colorazione che differenzia i batteri in due gruppi principali chiamati batteri gram negativi e batteri gram positivi. Pertanto, la differenza tra la colorazione di grammi e la coltura è che la colorazione di grammi è una tecnica di colorazione dei batteri mentre la coltura è un metodo per far crescere e mantenere i microrganismi nei laboratori.
