La differenza fondamentale tra il conteggio totale delle cellule e il conteggio delle cellule vitali è che il conteggio totale delle cellule stima tutte le cellule comprese le cellule microbiche viventi e morte in un campione mentre il conteggio delle cellule vitali stima solo le cellule microbiche viventi in un campione.
Il conteggio del numero di organismi all'interno di una popolazione è considerato necessario per la maggior parte del lavoro sperimentale. Pertanto, proviamo ad analizzare il numero di microbi all'interno di un campione utilizzando metodi diretti e indiretti. Le misurazioni dirette coinvolgono metodi che contano direttamente i numeri delle cellule. Le misurazioni indirette implicano la misurazione di alcuni parametri che possono essere correlati al numero di celle come la densità cellulare, il peso a secco, ecc. Alcuni metodi quantificano solo le cellule microbiche viventi in un campione. Il conteggio delle cellule vitali è uno di questi metodi. I conteggi microscopici diretti quantificano tutte le cellule in un volume noto di mezzo/campione utilizzando un microscopio. Pertanto, conta sia le cellule vive che quelle morte. È un tipo di conteggio totale delle cellule.
Che cos'è il conteggio totale delle cellule?
La conta cellulare totale è il metodo che prevede il conteggio di tutte le cellule in un volume noto di mezzo/campione utilizzando un microscopio e una camera di conteggio (emocitometro). A differenza dei conteggi vitali, vengono contate sia le cellule vive che quelle morte. Pertanto, questo è un conteggio totale a meno che non venga applicata una macchia di vitalità durante l'osservazione. In microscopia, le cellule vengono osservate direttamente al microscopio e contate. Utilizza una sospensione cellulare costituita da cellule microbiche. Per facilitare il conteggio e misurazioni accurate, è possibile eseguire la diluizione del campione. In concentrazioni molto alte/basse di cellule, ottenere il conteggio totale delle cellule utilizzando un microscopio è un compito difficile.
Figura 01: Camera di conteggio – Emocitometro
Le camere di conteggio sono facili, poco costose e veloci nel conteggio totale delle cellule. Ancora più importante, le camere di conteggio sono utili per contare sia gli eucarioti che i procarioti. Contiamo le cellule in quadrati selezionati di volume noto per quantificare il conteggio totale delle cellule.
Che cos'è il numero di cellule vitali?
Il conteggio delle cellule vitali è un metodo per contare le cellule microbiche viventi in un campione. Conta solo le cellule viventi nel campione. La conta delle piastre praticabili, la filtrazione su membrana e il numero più probabile sono poche tecniche di conta cellulare praticabili. Questi approcci sono basati sulla crescita. Il metodo di conteggio delle piastre praticabile è un potente metodo utilizzato in molti campi microbiologici, tra cui microbiologia alimentare e lattiero-casearia, microbiologia medica, microbiologia ambientale, genetica microbica, sviluppo di terreni di crescita e biotecnologie.
Il modo più comune per contare i batteri vitali è utilizzare un campione in grado di formare colonie su un terreno agar. Esistono due modi principali per eseguire un conteggio delle lastre: la tecnica con la piastra di diffusione e la tecnica con la piastra di versamento. Un volume noto di campione può essere sparso sulla superficie di una piastra di agar o miscelato nell'agar. La piastra viene quindi incubata e si contano le colonie che si formano. Il numero di colonie è correlato al numero di microrganismi all'interno del campione originale. I conteggi vitali misurano solo le cellule vive e in crescita.
Figura 02: Numero di piastre valide
Il numero più probabile (MPN) è un' alternativa ai metodi di conteggio delle piastre per stimare la densità di popolazione delle cellule vitali. Conta gli organismi che crescono in coltura liquida ed è quindi una tecnica prevalentemente batteriologica. È particolarmente utile per basse concentrazioni di organismi, ad es. latte, acqua potabile.
La tecnica di filtrazione a membrana è più adatta quando i microbi sono molto diluiti come nella rete idrica di una città. Viene fatto semplicemente facendo passare un volume noto del liquido attraverso un filtro e incubandolo su un mezzo nutriente. Vengono contate le colonie che si sviluppano sul filtro e vengono calcolati i batteri per millilitro di campione.
Quali sono le somiglianze tra il numero totale di cellule e il numero di cellule vitali?
- La conta cellulare totale e la conta cellulare vitale sono due tipi di tecniche microbiche che quantificano le cellule.
- Sono tecniche di conteggio comunemente utilizzate nei laboratori di microbiologia.
Qual è la differenza tra il numero totale di cellule e il numero di cellule vitali?
Il conteggio totale delle cellule enumera tutte le cellule microbiche viventi e morte in un campione. Al contrario, il conteggio delle cellule vitali enumera solo le cellule viventi in un campione. Quindi, questa è la differenza chiave tra il conteggio totale delle cellule e il conteggio delle cellule vitali. La conta cellulare totale è indipendente dalla crescita delle colonie sulle piastre di agar, mentre la conta cellulare vitale è una tecnica basata sulla crescita e dipende dalla crescita delle colonie microbiche sulle piastre di agar.
La seguente infografica riassume la differenza tra il conteggio totale delle cellule e il conteggio delle cellule vitali.
Riepilogo – Conteggio totale delle cellule vs conteggio delle cellule vitali
Il conteggio totale delle cellule enumera sia le cellule microbiche viventi che quelle morte mentre il conteggio delle cellule vitali enumera solo le cellule viventi. Pertanto, questa è la differenza chiave tra il conteggio totale delle cellule e il conteggio delle cellule vitali. Inoltre, la conta cellulare vitale è una tecnica basata sulla crescita, a differenza della conta cellulare totale. Inoltre, richiede l'incubazione delle piastre fino a ottenere le colonie visibili. La conta cellulare vitale, l'MPN e la filtrazione su membrana sono poche tecniche di conta cellulare vitale, mentre la microscopia diretta e l'uso dell'emocitometro sono due tecniche di conta cellulare totale.
