La differenza chiave tra il test radioimmunometrico e il test immunoradiometrico è che nel test radioimmunologico, il campione o il composto da misurare è combinato con un antigene radioattivo prima della combinazione, mentre nel test immunoradiometrico, il campione o il composto si combina immediatamente con il radiomarcato anticorpi.
Un test immunologico è un test biochimico che rileva la presenza o la concentrazione di macromolecole in una soluzione utilizzando un anticorpo o un antigene. Gli anticorpi fluorescenti e radioattivi vengono utilizzati per misurare gli antigeni in un campione. Inizialmente, gli anticorpi sono stati utilizzati nelle tecniche di precipitazione come l'immunoprecipitazione, l'immunodiffusione e l'immunoelettroforesi per l'analisi delle proteine sieriche. Attualmente, per la misurazione di farmaci, marcatori tumorali e ormoni vengono utilizzate tecniche altamente sensibili come i test radioimmunologici e immunoradiometrici.
Cos'è il test radioimmunologico?
Il test radioimmunologico (RIA) è un test immunologico che utilizza elementi radioattivi per la formazione graduale di complessi antigene-anticorpo. RIA di solito utilizza anticorpi radioattivi per rilevare la quantità di antigene in un campione. RIA è un test in vitro molto specifico e altamente sensibile. Il principio alla base della RIA è vincolante per la concorrenza. Qui, un antigene radioattivo compete con un antigene non radioattivo per una quantità costante di siti di legame dell'anticorpo o del recettore. RIA richiede licenze e precauzioni speciali poiché vengono utilizzate sostanze radioattive e rimane tra le tecniche meno costose.
Figura 01: Saggio immunologico
Durante la RIA, una quantità nota di antigene viene resa radioattiva frequentemente etichettandola con isotopi radioattivi gamma di iodio attaccati alla tirosina. Quindi questo antigene viene combinato con una quantità nota di anticorpi. Qui, sia l'antigene che l'anticorpo si legano specificamente l'uno all' altro. Quindi, viene aggiunto un campione di siero di sangue per avviare una reazione competitiva tra gli antigeni marcati e gli antigeni non marcati nel siero con anticorpi specifici. In questa reazione, gli anticorpi rilasciano una certa quantità di antigene marcato. Questa quantità è proporzionale al rapporto tra antigene marcato e antigene non marcato. Infine, viene generata una curva di legame per ricavare la quantità di antigene nel siero del sangue di un paziente.
Cos'è il test immunoradiometrico?
Il test immunoradiometrico (IRMA) è un test immunologico che utilizza anticorpi radiomarcati. In IRMA, gli anticorpi sono etichettati utilizzando radioisotopi. Questi anticorpi si legano agli antigeni presenti in un campione specifico. In un campione positivo, gli anticorpi marcati radioattivamente si legano agli epitopi liberi degli antigeni. Questo forma un complesso antigene-anticorpo.
Durante la seconda reazione, gli anticorpi marcati che non sono legati vengono rimossi utilizzando un antigene in fase solida. Il numero rimanente di anticorpi radioattivi nella soluzione è una funzione diretta della concentrazione dell'antigene. IRMA è noto come test di reagente in eccesso in cui viene utilizzata una quantità eccessiva di anticorpo radiomarcato come reagente. Qui, una concentrazione eccessiva di anticorpo o antigene marcato può reagire. Come passaggio finale, gli anticorpi legati all'antigene e quelli liberi vengono separati e la frazione legata all'antigene viene sottoposta a saggi radioattivi. Qui, l'attività della frazione è direttamente proporzionale alla concentrazione dell'antigene.
Quali sono le somiglianze tra il test radioimmunometrico e il test immunoradiometrico?
- Sia il dosaggio radioimmunometrico che quello immunoradiometrico sono saggi immunologici che utilizzano elementi radioattivi nella formazione graduale di complessi antigene-anticorpo.
- Formano un complesso antigene-anticorpo.
Qual è la differenza tra il test radioimmunometrico e il test immunoradiometrico?
Il test radioimmunologico è un test immunologico che determina i livelli di anticorpi da parte di un antigene marcato con un radioisotopo mentre il test immunoradiometrico è un test di reagente in eccesso che utilizza una concentrazione eccessiva di anticorpi radiomarcati. Pertanto, questa è la differenza chiave tra il test radioimmunologico e il test immunoradiometrico. IRMA è in grado di fornire una sensibilità maggiore rispetto a RIA. In RIA, gli antigeni sono etichettati con isotopi radioattivi gamma dello iodio mentre negli anticorpi IRMA sono etichettati utilizzando isotopi di iodio. Quindi, questa è anche una differenza tra il test radioimmunologico e il test immunoradiometrico. Poiché l'IRMA è una tecnica di reagente in eccesso, il test viene eseguito in un tempo più breve rispetto a RIA.
La tabella seguente riassume le differenze tra il dosaggio radioimmunometrico e il dosaggio immunoradiometrico.
Riepilogo – Saggio radioimmunologico vs saggio immunoradiometrico
Il test radioimmunologico è un test immunologico che utilizza elementi radioattivi in formazione graduale per determinare i livelli di anticorpi. La RIA di solito usa anticorpi radioattivi. Un antigene radioattivo compete con un antigene non radioattivo per una quantità costante di siti di legame dell'anticorpo o del recettore. Il test immunoradiometrico è un test immunologico effettuato per determinare i livelli di antigene di un campione utilizzando anticorpi radiomarcati. Questi anticorpi si legano agli antigeni presenti in un campione specifico. Alla fine di ogni test, si forma un complesso antigene-anticorpo. Per ottenere i risultati delle analisi, viene tracciata una curva di legame. Nel test radioimmunologico, la quantità di antigene marcato è proporzionale al rapporto tra antigene marcato e antigene non marcato, ma in un test immunoradiometrico l'attività della frazione legata all'antigene è direttamente proporzionale alla concentrazione dell'antigene. Questo è il riassunto della differenza tra test radioimmunometrico e test immunoradiometrico.
