Differenza chiave – Vettori YAC e BAC
I vettori sono usati nella clonazione molecolare. Un vettore può essere definito come una molecola di DNA che si comporta come un veicolo per trasportare materiale genetico estraneo in un' altra cellula. Un vettore contenente DNA estraneo è noto come DNA ricombinante e dovrebbe avere la capacità di replicarlo ed esprimerlo all'interno dell'organismo ospite. Il cromosoma artificiale del lievito (YAC) e il cromosoma artificiale batterico (BAC) sono due tipi di vettori coinvolti nella clonazione. Il differenza fondamentale tra YAC e BAC è quello YAC è un sistema vettoriale costruito artificialmente che utilizza una regione specifica del cromosoma di lievito per inserire grandi segmenti di materiale genetico nelle cellule di lievito mentre BAC è un sistema vettoriale costruito artificialmente utilizzando una regione specifica di E.coli per inserire grandi segmenti di DNA nelle cellule di E. coli.
Cosa sono i vettori YAC?
YAC (Yeast artificial cromosoma) è un cromosoma costruito artificialmente che ha la capacità di trasportare un ampio segmento di DNA estraneo e di replicarsi all'interno delle cellule di lievito. Ha un centromero, telomeri e sequenze che si replicano autonomamente che sono essenziali per la replicazione e la stabilità. YAC dovrebbe anche recare un marcatore selettivo o marcatori e siti di restrizione per renderlo un vettore di clonazione efficace. Una grande sequenza che va da 1000 kb a 2000 kb può essere inserita in YAC e trasferita nel lievito. L'efficienza di trasformazione di YAC è molto bassa.
Figura 01: vettore YAC
Cosa sono i vettori BAC?
Il cromosoma artificiale batterico (BAC) è un cromosoma costruito artificialmente per la clonazione molecolare. Ha regioni specifiche del plasmide E. coli F ed è circolare e super arrotolato. BAC è stato sviluppato per clonare frammenti di DNA sui batteri, in particolare su E. coli. Può contenere frammenti di DNA di dimensioni fino a 300 kb. Rispetto a YAC, gli inserti per clonazione BAC sono di dimensioni inferiori. I BAC sono stati sviluppati nel 1992 ed è ancora popolare grazie alla sua stabilità e facilità di costruzione. I BAC sono utili anche nello sviluppo di vaccini.
Figura 02: vettore BAC nella clonazione molecolare
Qual è la differenza tra i vettori YAC e BAC?
Vettori YAC vs BAC |
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| YAC è un cromosoma geneticamente modificato con l'uso del DNA di lievito a scopo di clonazione. | BAC è una molecola di DNA geneticamente modificata che utilizza il DNA di E. coli a scopo di clonazione. |
| Sesso | |
| Gli YAC sono stati progettati per clonare grandi frammenti di DNA genomico nel lievito. | BAC sono stati sviluppati per clonare grandi frammenti genomici in Escherichia coli. |
| Inserisci lunghezza | |
| Gli YAC possono contenere inserti genomici di dimensioni megabase.(1000 kb – 2000 kb). | I BAC possono trasportare inserti di 200–300 kb o meno. |
| Costruzione | |
| Il DNA YAC è difficile da purificare intatto e richiede un'elevata concentrazione per generare il sistema vettore YAC. | BAC è facile da purificare intatto e può essere facilmente costruito. |
| Chimerismo | |
| Gli YAC sono spesso chimerici. | I BAC sono raramente chimerici. |
| Stabilità | |
| YAC è instabile. | BAC è stabile. |
| Modifiche | |
| La ricombinazione del lievito è molto fattibile e rimane sempre attiva. Quindi può generare eliminazioni e altri riarrangiamenti in un YAC. | E. la ricombinazione di coli viene impedita e viene attivata quando necessario. Quindi, riduce i riarrangiamenti indesiderati nei BAC. |
| Manutenzione | |
| La manipolazione di YAC ricombinanti di solito richiede il trasferimento di YAC in E. coli per la successiva manipolazione. Quindi, è un processo laborioso. | La modifica del BAC avviene direttamente in E. coli. Quindi non è necessario il trasferimento del DNA. Quindi, il processo non è laborioso. |
Riepilogo – Vettori YAC vs BAC
YAC è diventato uno strumento di ricerca essenziale nei processi di clonazione grazie alla sua capacità di clonare grandi frammenti di DNA nell'organismo ospite. Tuttavia, gli YAC presentano diversi svantaggi come vettori come difficoltà di costruzione, chimerismo, instabilità, ecc. Pertanto, per superare questi problemi, gli scienziati hanno sviluppato vettori BAC. BAC è stato costruito utilizzando regioni specifiche del cromosoma E. coli. È un vettore stabile e può essere facilmente costruito. Tuttavia, la lunghezza del DNA che BAC può gestire è fino a 20 volte inferiore a quella di YAC. Questa è la differenza tra i sistemi vettoriali YAC e BAC. Al giorno d'oggi, BAC è più preferito rispetto a YAC nei laboratori.
