La differenza fondamentale tra l'eluizione isocratica e quella a gradiente è che l'eluizione isocratica si riferisce al mantenimento di una concentrazione costante nella fase mobile, mentre l'eluizione a gradiente si riferisce al mantenimento di una concentrazione variabile nella fase mobile.
I termini isocratico e gradiente eluizione sono usati in cromatografia. Durante una corsa cromatografica, utilizziamo una fase stazionaria, che è una sostanza non in movimento, insieme a una fase mobile, la sostanza in movimento. L'eluizione isocratica e gradiente descrive le proprietà della fase mobile.
Cos'è l'eluizione isocratica?
Eluizione isocratica è un termine usato in cromatografia quando la fase mobile ha una concentrazione costante. Qui, la concentrazione della fase mobile è costante durante tutto il processo cromatografico. In questo processo, possiamo osservare l'ampiezza del picco che aumenta con il tempo di ritenzione in modo lineare nel cromatogramma. Tuttavia, ciò comporta uno svantaggio: i picchi di eluizione tardiva per l'eluizione tardiva diventano molto piatti e ampi. Pertanto, questi ampi picchi diventano difficili da riconoscere come picchi.
Inoltre, in eluizione isocratica, la selettività non cambia a seconda delle dimensioni della colonna. Ciò significa che la selettività non dipende dalle modifiche alle dimensioni delle colonne. Qui, la lunghezza e il diametro sono considerati come dimensioni della colonna. Pertanto, i picchi eluiscono nello stesso ordine.
Cos'è l'eluizione del gradiente?
Eluizione gradiente è un termine usato in cromatografia quando qui la fase mobile ha una concentrazione variabile. In altre parole, la concentrazione della fase mobile non deve rimanere costante. Ad esempio, in HPLC, un metodo di separazione comune utilizza inizialmente il 10% di metanolo e termina al 90%, aumentando gradualmente la concentrazione. La fase mobile ha due componenti: un solvente debole e un solvente forte. Un solvente debole consente al soluto di eluire lentamente mentre un solvente forte provoca la rapida eluizione del soluto. Nella cromatografia in fase inversa, utilizziamo l'acqua come solvente debole e il solvente organico come solvente forte.
Figura 01: HPLC
Inoltre, il metodo di eluizione a gradiente riduce i componenti che eluiscono successivamente per farli eluire più velocemente, fornendo un picco stretto nel cromatogramma. Questo metodo migliora anche la forma del picco e l' altezza del picco. Inoltre, nella tecnica dell'eluizione a gradiente, l'ordine di eluizione cambia al variare delle dimensioni della colonna.
Qual è la differenza tra eluizione isocratica e gradiente?
I termini isocratico e gradiente eluizione sono usati in cromatografia. L'eluizione isocratica e gradiente descrivono le proprietà della fase mobile. La differenza chiave tra l'eluizione isocratica e quella a gradiente è quella l'eluizione isocratica si riferisce al mantenimento di una concentrazione costante nella fase mobile mentre l'eluizione a gradiente si riferisce al mantenimento di una concentrazione variabile nella fase mobile.
Nella tecnica di eluizione isocratica, l'ampiezza del picco aumenta linearmente con il tempo di ritenzione. Tuttavia, nella tecnica di eluizione a gradiente, la ritenzione dei componenti a eluizione successiva viene ridotta, in modo che l'eluizione diventi più veloce e dia picchi stretti. A parte questo, nell'eluizione isocratica, la selettività non dipende dalle dimensioni della colonna, ma nell'eluizione a gradiente, la selettività cambia al variare delle dimensioni della colonna.
La tabella seguente riassume la differenza tra eluizione isocratica e gradiente.
Riepilogo – Eluizione isocratica vs gradiente
L'eluizione isocratica e l'eluizione del gradiente descrivono le proprietà della fase mobile. La differenza chiave tra l'eluizione isocratica e quella a gradiente è quella l'eluizione isocratica si riferisce al mantenimento di una concentrazione costante nella fase mobile mentre l'eluizione a gradiente si riferisce al mantenimento di una concentrazione variabile nella fase mobile.
