La differenza chiave tra HEK293 e HEK293t è che HEK293 è una linea cellulare immortalata derivata dal rene umano embrionale che viene trasfettato con adenovirus umano tranciato di tipo 5DNA mentre HEK293t è una linea cellulare figlia derivata dalla linea cellulare originale HEK293 che è trasfettato con un vettore plasmidico che porta l'origine della replicazione SV40.
La trasfezione è solitamente definita come il processo di introduzione di DNA e RNA estranei nelle cellule al fine di influenzarne il genotipo e il fenotipo. Tali introduzioni di acidi nucleici estranei attraverso vari metodi biologici, chimici e fisici possono modificare le proprietà della cellula. In definitiva, ciò consente lo studio della funzione genica e dell'espressione proteica nel contesto della cellula. HEK293 e HEK293t sono due linee cellulari che sono state ampiamente utilizzate nella ricerca di biologia cellulare per molti anni a causa della loro propensione alla trasfezione.
Cos'è HEK293?
HEK293 è una linea cellulare immortalata derivata dal rene umano embrionale che viene trasfettato con adenovirus umano tagliato di tipo 5DNA per produrre molte proteine ricombinanti. Gli HEK293 sono stati originariamente isolati da cellule renali umane dal biologo olandese Alex Van der Eb nel 1973. Queste cellule sono state coltivate in colture di tessuti da un feto femmina. Successivamente, sono stati trasfettati con adenovirus umano tranciato di tipo 5DNA da Frank Graham, un borsista post-dottorato nel laboratorio di Van der Eb. Questa linea cellulare è stata denominata HEK293 perché era l'esperimento 293rd di Frank.
Figura 01: HEK293
L'incorporazione di geni adenovirali nel genoma delle cellule HEK consente a queste cellule di produrre un'elevata quantità di proteine ricombinanti in modo molto efficiente. Inoltre, il vettore adenovirale contiene la regione del promotore del CMV; quindi, aumenta ulteriormente questa efficienza. Questa linea cellulare è stata utilizzata come ospite per studi sull'espressione genica. Questa linea cellulare è utilizzata anche dall'industria biotecnologica per produrre proteine terapeutiche per la terapia genica.
Cos'è HEK293t?
HEK293t è una linea cellulare figlia derivata dalla linea cellulare originale HEK293 che viene trasfettata con un vettore plasmidico che porta l'origine della replicazione SV40 per produrre un'elevata quantità di proteine ricombinanti. HEK293t è una linea cellulare umana che esprime una versione mutante dell'antigene T grande SV40. HEK293t è stato creato nel laboratorio di Michele Carlos a Stanford attraverso la trasfezione stabile della linea cellulare HEK29E con un plasmide che codifica per un mutante termosensibile dell'antigene T grande SV40. Originariamente era indicato come 293/tsA1609neo. Questo perché la trasfezione utilizzata per creare una linea cellulare che conferisce resistenza alla neomicina ed espressione dell'allele tsA 1609 dell'antigene T grande SV40.
Figura 02: HEK293t
A causa dell'espressione di una versione mutante dell'antigene T grande SV40, i plasmidi trasfettati con origine di replicazione SV 40 possono aumentare notevolmente la quantità di proteina ricombinante. Questa linea cellulare è comunemente usata nell'industria biotecnologica per l'espressione di proteine e la produzione di retrovirus ricombinanti.
Quali sono le somiglianze tra HEK293 e HEK293t?
- HEK293 e HEK293t sono due linee cellulari che sono state ampiamente utilizzate nella ricerca in biologia cellulare a causa della loro propensione alla trasfezione.
- Entrambe le linee cellulari sono derivate da laboratorio.
- Queste linee cellulari possono aumentare notevolmente la quantità di produzione di proteine ricombinanti.
- Sono prodotti trasfettando cellule renali umane embrionali con un vettore plasmidico.
Qual è la differenza tra HEK293 e HEK293t?
HEK293 è una linea cellulare immortalata derivata dal rene umano embrionale che viene trasfettato con adenovirus umano tagliato di tipo 5DNA. Al contrario, HEK293t è una linea cellulare figlia derivata dalla linea cellulare originale HEK293 che viene trasfettata con un vettore plasmidico che porta l'origine della replicazione SV40. Quindi, questa è la differenza chiave tra HEK293 e HEK293t. Inoltre, HEK293 non esprime la versione mutante dell'antigene T grande SV40. D' altra parte, HEK293t esprime la versione mutante dell'antigene T grande SV40.
La seguente infografica elenca le differenze tra HEK293 e HEK293t in forma tabellare per un confronto affiancato.
Riepilogo – HEK293 vs HEK293t
HEK293 e HEK293t sono due linee cellulari che sono state ampiamente utilizzate nella ricerca in biologia cellulare a causa della loro crescita costante e propensione alla trasfezione. HEK293 è una linea cellulare immortalata derivata da un rene umano embrionale che viene trasfettato con adenovirus umano tranciato di tipo 5DNA, mentre HEK293t è una linea cellulare figlia derivata dalla linea cellulare originale HEK293 che viene trasfettata con un vettore plasmidico che trasporta l'origine della replicazione SV40. Pertanto, questo riassume la differenza tra HEK293 e HEK293t.
