La differenza chiave tra la colorazione di Giemsa e la colorazione di Leishman è che la colorazione di Giemsa è utile nella colorazione di regioni del DNA di cromosomi diversi per studiare diverse aberrazioni come traslocazioni e riarrangiamenti, mentre la colorazione di Leishman è utile durante la colorazione e l'analisi dello striscio di sangue per differenziare e identificare tripanosomi, leucociti e parassiti della malaria.
La colorazione è un passaggio fondamentale durante il miglioramento del contrasto di un'immagine microscopica nel contesto della microscopia, in particolare per evidenziare diverse strutture in cellule e tessuti biologici. Il colorante Giemsa e il colorante Leishman appartengono al gruppo dei coloranti Romanowsky, che comprende anche il colorante Wright e il colorante Jenner. Comunemente, le macchie di Romanowsky sono utili per colorare gli strisci di sangue. Lo usiamo principalmente durante lo studio della morfologia dei globuli rossi e l'esecuzione della conta differenziale dei globuli bianchi. I coloranti eosina Y e azzurro B sono i componenti comuni per le macchie di Romanowsky. Le procedure di colorazione di Romanowsky aiutano nella diagnosi di diverse condizioni patologiche come la leucemia.
Cos'è Giemsa Stain?
La colorazione di Giemsa di solito aiuta a differenziare tra la morfologia citoplasmatica e quella nucleare dei globuli come globuli bianchi, globuli rossi e piastrine. Inoltre, aiuta a differenziare i parassiti. Principalmente, viene utilizzato per la citogenetica e nella diagnosi della malaria e di altre malattie parassitarie. Inoltre, la colorazione di Giemsa è specifica per i gruppi fosfato presenti nel DNA. Aderiscono alle aree dove c'è un numero maggiore di legami adenina-timina nel filamento di DNA.
Figura 01: Colorazione Giemsa
Inoltre, la colorazione di Giemsa è utile anche nella banda di Giemsa o nella banda G per colorare i cromosomi e generare cariogrammi. Pertanto, la colorazione di Giemsa ha la capacità di identificare e visualizzare diverse anomalie nei cromosomi. Ad esempio, il trofozoite di Trichomonas vaginalis, che emette una secrezione verdastra ed è costituito da cellule mobili su preparazioni umide, viene colorato con la colorazione di Giemsa. Come accennato in precedenza, la macchia di Giemsa agisce come una tipica macchia di striscio sanguigno. Quando colorati, i globuli rossi si colorano di rosa, le piastrine si colorano di rosa chiaro o pallido e il citoplasma di linfociti, monociti e leucociti si colorano rispettivamente di azzurro, azzurro e magenta.
Il colorante Giemsa è una miscela di eosina, blu di metilene e azzurro B. La miscela di azzurro di metilene che forma un eosinato insieme al blu di metilene stabilizza questa miscela. Nel processo di colorazione di Giemsa, una pellicola sottile del campione viene prima posizionata su un vetrino microscopico. Il passaggio successivo consiste nel fissare con metanolo puro per circa 30 secondi aggiungendo alcune gocce di metanolo sul vetrino. Quindi, il vetrino viene immerso nella soluzione colorante Giemsa al 5% per circa 20-30 minuti. Il passaggio finale è lavare il vetrino con acqua del rubinetto e lasciarlo asciugare.
Cos'è la macchia di Leishman?
Il patologo scozzese William Boog Leishman è lo sviluppatore della colorazione Leishman. È una delle macchie che appartiene al gruppo delle macchie di Romanowsky. Inoltre, è utilizzato più comunemente nella differenziazione e nell'identificazione di diversi parassiti malarici, i tripanosomi, un protozoo flagellato unicellulare, che sono parassiti e leucociti.
Figura 02: Macchia di Leishman
La base del colorante Leishman è una miscela metanolica che contiene una miscela di blu di metilene che è 'policromo'; demetilato in diversi tipi di azzurri ed eosina. Data la stabilità della soluzione madre della miscela metanolica, possiamo utilizzarla direttamente per fissare lo striscio, eliminando la fase di prefissaggio. La stabilità diminuisce se la soluzione viene miscelata con un tampone acquoso. Quando si esegue la conta cellulare differenziale, la colorazione di Leishman fornisce il caratteristico colore viola brillante al nucleo e ai granuli dei neutrofili. Pertanto, migliora la differenziazione tra il nucleo e il citoplasma. Inoltre, il colorante Leishman fornisce una colorazione contrastiva di maggiore qualità rispetto ad altri coloranti a base di blu di metilene ed eosina.
Poiché i diversi componenti citoplasmatici sono trattati in modo preciso per la differenziazione e l'identificazione, gli ematologi preferiscono la colorazione Leishman rispetto ad altre colorazioni Romanowsky. Nella rilevazione dei parassiti della malaria, le procedure di colorazione Leishman sono più sensibili e accurate di altre colorazioni come quella di Field.
Quali sono le somiglianze tra Giemsa Stain e Leishman Stain?
- Il colorante Giemsa e il colorante Leishman sono coloranti differenziali.
- Entrambi sono utili durante l'esecuzione della conta differenziale dei globuli bianchi e lo studio della morfologia cellulare dei globuli rossi.
- Inoltre, entrambe le macchie appartengono al gruppo delle macchie di Romanowsky.
Qual è la differenza tra la macchia di Giemsa e la macchia di Leishman?
La colorazione di Giemsa è utile nella colorazione delle regioni del DNA di diversi cromosomi per studiare diverse aberrazioni come traslocazioni e riarrangiamenti, mentre la colorazione di Leishman è utile nella colorazione del sangue per differenziare e identificare tripanosomi, leucociti e parassiti della malaria. Quindi, questa è la differenza chiave tra la macchia di Giemsa e la macchia di Leishman.
Inoltre, il batteriologo Gustav Giemsa ha sviluppato la tecnica di colorazione di Giemsa, mentre il patologo William Boog Leishman ha sviluppato la tecnica di colorazione di Leishman. Inoltre, un' altra differenza significativa tra la colorazione di Giemsa e la colorazione di Leishman è la composizione della colorazione. La colorazione di Giemsa è una miscela di eosina, blu di metilene e azzurro B, mentre la colorazione di Leishman è una miscela metanolica che contiene una miscela di blu di metilene.
Riepilogo – Giemsa Stain vs Leishman Stain
Nel contesto della microscopia, le tecniche di colorazione svolgono un ruolo importante nel migliorare il contrasto delle immagini microscopiche di vari tessuti biologici. La colorazione di Giemsa è utile nella colorazione delle regioni del DNA di cromosomi diversi per studiare diverse aberrazioni come traslocazioni e riarrangiamenti. La colorazione di Leishman è utile nella colorazione e nell'analisi degli strisci di sangue per differenziare e identificare i tripanosomi, i leucociti e i parassiti della malaria. Quindi, questa è la differenza tra la macchia di Giemsa e la macchia di Leishman.