Differenza chiave – Trasformanti vs ricombinanti
Ricombinazione e trasformazione sono due passaggi cruciali nell'ingegneria genetica, in cui le caratteristiche di un organismo vengono deliberatamente modificate manipolando il suo materiale genetico. La ricombinazione è un processo in cui il DNA estraneo viene incorporato in un genoma vettoriale e si forma una molecola di DNA ricombinante. La trasformazione è il passaggio successivo in cui la molecola ricombinante viene inserita nell'organismo ospite. La cellula ospite o l'organismo facilita l'espressione della molecola ricombinante. Il differenza fondamentale tra trasformanti e ricombinanti è quello i trasformanti sono le cellule o gli organismi che prendono la molecola ricombinante all'interno e facilitano l'espressione mentre i ricombinanti sono i vettori che consentono l'inserimento del DNA estraneo nel suo genoma e il trasporto nei trasformanti ospiti per l'espressione.
Cosa sono i trasformanti?
I trasformanti sono le cellule o gli organismi in cui il DNA ricombinante viene assorbito per l'espressione. I batteri sono comunemente usati come organismi ospiti nell'ingegneria genetica poiché sono facili da coltivare, moltiplicare e gestire in condizioni di laboratorio e il processo di trasformazione è facile rispetto ad altri organismi. Il batterio ospite più popolare utilizzato nell'ingegneria genetica è il batterio E coli.
Durante il processo di trasformazione, le cellule ospiti vengono indotte ad assorbire i ricombinanti. Tuttavia, alcune cellule ospiti non assorbono molecole ricombinanti. Sono conosciuti come non trasformanti e le cellule che contengono molecole di DNA ricombinante all'interno sono conosciute come trasformanti. La selezione dei trasformanti dai non trasformanti viene effettuata utilizzando marcatori selezionabili in biologia molecolare. I marcatori selezionabili vengono inseriti nel genoma del vettore insieme all'inserto del DNA. I marcatori selezionabili comunemente usati sono geni resistenti agli antibiotici. I geni marcatori facilitano la differenziazione dei trasformanti e continuano il processo. Dopo il processo di trasformazione, il batterio viene coltivato in un mezzo contenente antibiotici. Solo i trasformanti sono in grado di crescere su quel mezzo poiché possiedono i ricombinanti all'interno.
Una volta che la molecola di DNA ricombinante viene trasformata all'interno dell'organismo ospite, il DNA estraneo può essere integrato nel genoma della cellula ospite o rimanere non integrato nel citoplasma. Tuttavia, l'espressione e la replicazione del DNA estraneo si verificano nell'organismo ospite e producono il risultato desiderato dal processo.
Cosa sono i ricombinanti?
Un ricombinante è un organismo o una cellula che possiede un genoma ricombinato contenente DNA estraneo. I ricombinanti sono il risultato del processo di ingegneria genetica. Sono costruiti artificialmente in vitro inserendo i geni di interesse e modificando il genoma. Spesso i plasmidi batterici e i batteriofagi agiscono come ricombinanti nell'ingegneria genetica. Ha chimere di diversi DNA. La molecola di DNA ricombinante trasporta il DNA estraneo all'organismo ospite e lo fa esprimere e formare il prodotto desiderato.
Le molecole ricombinanti sono costruite usando endonucleasi di restrizione e DNA ligasi. Il frammento di DNA desiderato viene separato dall'organismo originale e inserito nel vettore per rendere il ricombinante per la trasformazione. Il taglio del gene di interesse e l'apertura dell'organismo vettore devono essere eseguiti utilizzando lo stesso enzima di restrizione per creare estremità adesive compatibili per unirle insieme. Una volta che il DNA estraneo è incorporato nel genoma del vettore, è noto come molecola di DNA ricombinante o ricombinante.
Figura 02: DNA ricombinante
Qual è la differenza tra trasformanti e ricombinanti?
Trasformanti vs ricombinanti |
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| I trasformanti sono le cellule che contengono una molecola di DNA ricombinante. | I ricombinanti sono le molecole carrier che hanno DNA estraneo inserito nel proprio genoma. |
| Espressione di DNA estraneo | |
| Sono le cellule ospiti in grado di esprimere il DNA ricombinante. | Dovrebbero essere in grado di auto-replicarsi all'interno dell'organismo ospite. |
| Selezione | |
| Le cellule che possono essere facilmente coltivate e moltiplicate vengono selezionate come cellule ospiti. | Devono essere facilmente estraibili e contenere dei marker selezionabili. |
Riepilogo – Trasformanti vs ricombinanti
I trasformanti sono le cellule o gli organismi con molecole di DNA ricombinante al loro interno. I ricombinanti sono gli organismi o le cellule che hanno subito la ricombinazione genetica e hanno DNA estraneo all'interno dei loro genomi. Le cellule batteriche sono spesso utilizzate come cellule ospiti per la trasformazione e plasmidi e batteriofagi sono spesso usati come vettori nella tecnologia del DNA ricombinante. Questa è la differenza tra trasformanti e ricombinanti.
