La differenza fondamentale tra elettroporazione e microiniezione è che l'elettroporazione è una tecnica che utilizza un impulso elettrico ad alta tensione per fornire il DNA nelle cellule ospiti mentre la microiniezione è una tecnica che utilizza un ago di vetro a punta fine o una micropipetta per fornire il DNA in cellule ospiti.
La trasformazione è il processo mediante il quale il DNA estraneo viene trasferito alle cellule ospiti. Con la trasformazione, la composizione genetica dell'organismo può essere alterata. Esistono diversi metodi di trasformazione chimica, biologica e fisica. Alcuni sono metodi diretti, mentre altri sono metodi indiretti. L'elettroporazione e la microiniezione sono due metodi fisici che sono metodi di trasformazione diretta. L'elettroporazione utilizza un campo elettrico per indurre pori microscopici nelle membrane cellulari biologiche al fine di incorporare il DNA nelle cellule ospiti. La microiniezione, d' altra parte, fornisce direttamente il DNA utilizzando una micropipetta o un ago di vetro a punta fine.
Cos'è l'elettroporazione?
L'elettroporazione è una tecnica di trasformazione che trasporta il DNA nelle cellule vegetali e nei protoplasti. Questa tecnica utilizza un impulso elettrico ad alta tensione. I materiali vegetali vengono incubati in una soluzione tampone contenente DNA. Quindi la soluzione viene sottoposta ad un impulso elettrico ad alta tensione. I pori indotti dall' alta tensione vengono creati nelle membrane delle cellule vegetali e, attraverso questi pori, il DNA migra all'interno delle cellule e si integra con il DNA genomico delle piante. L'efficienza di questo metodo dipende dai materiali vegetali e dalle condizioni di trattamento.
Figura 01: Elettroporazione
Quando la trasformazione viene eseguita utilizzando l'elettroporazione, solo il 40-50% delle cellule riceve il DNA. Inoltre, solo il 50 % delle cellule trasformate può sopravvivere con questo metodo. Tuttavia, questo metodo è facile da eseguire e non altera la struttura biologica o la funzione delle cellule. Inoltre, può essere utilizzato per un'ampia gamma di celle.
Cos'è la microiniezione?
La microiniezione è una tecnica di trasformazione particolarmente utile quando si introduce il DNA in cellule di grandi dimensioni. Questo metodo utilizza un ago di vetro a punta fine o una micropipetta per fornire il DNA in protoplasti vegetali o cellule animali (ovociti, uova ed embrioni). In effetti, questo metodo è più adatto per realizzare animali transgenici come i topi. In questo metodo, il DNA viene incorporato direttamente nel nucleo o nel citoplasma.
Simile all'elettroporazione, la microiniezione è una tecnica di trasformazione diretta. La microiniezione viene eseguita con una configurazione di microscopio specializzato. Il controllo computerizzato della pipetta, dell'ago, del microscopio e della tecnologia video ha aumentato l'efficacia di questa tecnica. Quando si inietta il DNA, un colorante può essere utilizzato per identificare facilmente le cellule trasformate. Pertanto, non è necessario utilizzare un metodo separato per identificare le celle trasformate. Ancora più importante, la procedura di microiniezione non richiede un gene marcatore.
Figura 02: Microiniezione
Inoltre, questo metodo è molto efficace e riproducibile. Tuttavia, questo metodo è costoso, richiede tempo e richiede personale qualificato. Inoltre, solo un piccolo numero di cellule può essere trattato con questo metodo.
Quali sono le somiglianze tra elettroporazione e microiniezione?
- Sia l'elettroporazione che la microiniezione sono due tipi di tecniche di trasformazione.
- Questi metodi trasportano il DNA nelle cellule vegetali e nei protoplasti.
- Sono metodi diretti.
- Inoltre, sono metodi fisici o meccanici.
- Entrambi i metodi sono utili quando si producono piante e animali transgenici.
Qual è la differenza tra elettroporazione e microiniezione?
La tecnica di elettroporazione utilizza un campo elettrico per introdurre il DNA mentre la tecnica di microiniezione è una micropipetta o un ago di vetro a punta fine per introdurre il DNA. Quindi, questa è la differenza chiave tra elettroporazione e microiniezione. Inoltre, l'elettroporazione viene utilizzata principalmente per cellule vegetali e protoplasti mentre la microiniezione viene utilizzata principalmente per cellule animali. Inoltre, l'elettroporazione non richiede tanto tempo quanto la microiniezione.
L'infografica qui sotto riassume le differenze tra elettroporazione e microiniezione in forma tabellare.
Riepilogo – Elettroporazione vs Microiniezione
L'elettroporazione e la microiniezione sono due metodi fisici di trasferimento genico. L'elettroporazione utilizza un campo elettrico ad alta tensione mentre la microiniezione utilizza un ago di vetro o una micropipetta. Quindi, questa è la differenza chiave tra elettroporazione e microiniezione. Tuttavia, entrambi i metodi introducono direttamente il DNA esogeno nelle cellule ospiti.
